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标题: 请教丁老师和组化高手 [打印本页]

作者: showtime 时间: 2011-4-4 18:54 标题: 请教丁老师和组化高手

现在免疫组化修复大多采用高温高压法，主要是针对柠檬酸修复液
想问下EDTA修复液是否可以采用同样高压法呢？
谢谢

作者: shanghainese 时间: 2011-4-5 11:51

可以，但要小心。
一般来说，终端用户也就是病理科的医生技术员没有必要对商业化的一抗作再次试验，只要根据说明书上的步骤去操作就可以了。因为抗体在研制或生产过程中已经作了大量的研究测试工作，得出了每一个抗体所需要的抗原修复的条件。如果改变抗原修复条件，很可能得出不同结果。这对诊断带来麻烦。

作者: vitaminpp 时间: 2011-4-6 08:48

学习了

作者: flyinmyl 时间: 2011-5-13 08:48

路过取经

作者: maikaze 时间: 2011-5-16 13:13

半年前，试剂供应商换成了泉晖国际，他家的修复方法完全不用EDTA，我们做EGFR常常阴性，心里总是忐忑……

作者: xkj2797xkj 时间: 2011-5-16 21:27

引用:

原帖由 maikaze 于 2011-5-16 13:13 发表
半年前，试剂供应商换成了泉晖国际，他家的修复方法完全不用EDTA，我们做EGFR常常阴性，心里总是忐忑……

还是有一些要用EDTA处理的！比如CD10、CD15、CD30等等，我在做的时候，是用微波处理，效果还不错！

作者: promotion 时间: 2011-5-17 17:05

引用:

原帖由 maikaze 于 2011-5-16 13:13 发表
半年前，试剂供应商换成了泉晖国际，他家的修复方法完全不用EDTA，我们做EGFR常常阴性，心里总是忐忑……

跟一张阳性片，这样也是对病人负责，EGFR一般用柠檬酸或不需要预处理。

作者: dingwei 时间: 2011-5-17 21:14

柠檬酸修复液采用高温高压法，EDTA修复液采用微波处理或水煮。

作者: juefei 时间: 2011-5-17 22:30

请问老师ck20一般用什么修复?我们这效果总是不很好。不知是试剂的问题还是修复的问题？

作者: 病理小生 时间: 2011-5-17 22:45

我们全是EDTA高压修复！一周500张片子

作者: dingwei 时间: 2011-5-18 08:05

EDTA高压修复会引起细胞核碎裂和非特异性染色出现的现象。

作者: flyinmyl 时间: 2011-5-18 21:07

ck20用ph6.0枸橼酸高压修复效果就很好了；EDTA可以用高压修复，但是至少在我们实验室是不稳定的，现在已经淘汰了，用水浴锅效果很好。

作者: zhww626090 时间: 2011-5-19 13:05

我们认为抗原修复非常重要，特别是采用EDTA高压修复，对标本固定的要求非常严格，大多数抗原修复可采用EDTA高压修复，前提是要选择合适的一抗稀释比，包括一抗为工作液

作者: juefei 时间: 2011-5-19 18:18 标题: ck20

水浴锅修复怎么修复？

作者: shanghainese 时间: 2011-5-25 21:33

引用:

原帖由 dingwei 于 2011-5-18 08:05 发表
EDTA高压修复会引起细胞核碎裂和非特异性染色出现的现象。

作者: xiaoniou777 时间: 2011-5-25 23:18 标题: 标题

用微波修复需要多长时间呢？

作者: xkj2797xkj 时间: 2011-5-26 21:10

引用:

原帖由 xiaoniou777 于 2011-5-25 23:18 发表
用微波修复需要多长时间呢？

在微波炉里高档火加热修复液至沸腾后，再把待处理的切片放入修复液中，中低档或加热15-20分钟后就可以！

作者: yinyong 时间: 2011-5-26 21:51

ck20也可胃酶37度消化三十分

作者: xiaoniou777 时间: 2011-5-27 05:28

在这个过程中需要不断添加修复液吗？

作者: xkj2797xkj 时间: 2011-5-27 12:57

引用:

原帖由 xiaoniou777 于 2011-5-27 05:28 发表
在这个过程中需要不断添加修复液吗？

不用!

作者: savant0196 时间: 2011-6-7 22:26

对于CK系列的抗体都是非常好做的，EDTA微波修复15分钟左右就可以了。但有些抗体如S-100、Cyclin-D1等就比较容易出背景，在显色时要严格镜下控制才行。

作者: xkj2797xkj 时间: 2011-6-7 23:05

引用:

原帖由 savant0196 于 2011-6-7 22:26 发表
对于CK系列的抗体都是非常好做的，EDTA微波修复15分钟左右就可以了。但有些抗体如S-100、Cyclin-D1等就比较容易出背景，在显色时要严格镜下控制才行。

好好看看书！！！

作者: flyaqmt 时间: 2011-6-8 09:01

我听过周小鸽教授的讲课，他们那儿除了不修复及用胰酶修复的抗体外，其它全用PH9.0EDTA修复，使用微波修复15-20分钟。我们现在是核阳性的用EDTA修复，胞膜及浆阳性的用柠檬酸修复。

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