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标题: 冰冻切片固定方法的改进（转载节选） [打印本页]

作者: 九日 时间: 2011-4-11 15:32 标题: 冰冻切片固定方法的改进（转载节选）

冰冻切片固定方法的改进
　冰冻切片在病理快速诊断中运用广泛, 但要做好一张优良的冰冻切片并非容易, 尤其是冰冻组织固定不良会造成切片背景不清, 染色不良等问题[1 ]。近年来我们运用改良HS (Hazard and Steven son) 固定液[2 ]和Clarke 固定液的双重固定法替代Clarke 固定液[3 ] 单
液固定法对切片进行固定, 使冰冻切片质量有了明显的提高, 报道如下。
　　一、固定液的配制
　　(一) 改良HS 固定液(A 液) 　中性缓冲福尔马林80m l, 95% 酒精19m l, 冰醋酸1m l。
　　(二) Clarke 固定液(B 液) 　无水酒精75m l, 冰醋酸25m l。
　　二、组织切片
　　切取1. 5cm ×1. 2cm 厚0. 5cm 手术新鲜组织用OCT 包埋后置于恒冷切片机快速冷冻后, 同一组织制备厚为6Lm 连续切片2 张。
　　三、固定方法
　　实验组: 将一张切片放置半干后, 立即放入A 液内固定30 秒～ 1 分钟, 后流水冲洗30 秒, 再置入B 液内固定1 分钟; 对照组: 将另一张切片放置半干后, 直接置于B 液固定1 分钟。
　　四、染色
　　两组切片经固定后入哈立氏苏木素液3 分钟后,1% 盐酸酒精分化5 秒, 流水泛蓝5 分钟, 伊红染液1分钟, 梯度酒精脱水, 二甲苯透明, 树胶封片。
结　　果
　　显微镜观察两组切片发现: 应用双重固定法的实验组比使用单固定法的对照组冰冻切片质量明显提高, 具体优点为: 切片背景清楚, 实质细胞及间质组织结构清晰, 细胞核嗜苏木素, 胞浆嗜伊红性, 两者对比
　分明,
此文转载于《ShanghaiM ed J 》,M ay 1998,Vo l. 21,No. 5》
作者：姚海嵩　杨　践　金晓龙　曹福妹　丁长囡

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