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标题: 不脱钙骨超薄切片的制备（转载节选） [打印本页]

作者: 九日 时间: 2011-5-8 18:48 标题: 不脱钙骨超薄切片的制备（转载节选）

1 　材料和方法
111 　动物和取材　试验用成年雄性Wistar 大鼠,在戊巴比妥钠腹腔麻醉下,迅速取出股骨头、股骨颈和腰椎椎体。
112 　依次按以下步骤制备超薄切片: (1) 立即投入2 %多聚甲醛23 %戊二醛溶液内固定2 小时,4 ℃; (2) 4 ℃011M 磷酸缓冲液冲洗2 小时; (3) 4 ℃1 %锇酸溶液后固定2 小时; (4) 梯度丙酮脱水; (5) 浸渗Spurr :用丙酮2Spurr 混合液分3 步浸渗,每步2 小时。丙酮:Spurr 的比例依次为3∶1 ,1∶1 和1∶3 ; (6)Spurr 包埋液包埋; (7) L KB2V 超薄切片机和钻石刀切片,厚度500 埃; (8) 醋酸铀2枸橼酸铅双重复染。
113 　日本J EM1200EX 透射电镜观察和拍照。
2 　　电镜观察结果
211 　骨细胞与骨基质　骨细胞陷窝的周围有大量钙盐沉积。可见处于不同钙化时期的骨细胞(图1) ,早期埋入钙化基质内的骨细胞,含有比较多的细胞器。在骨基质中,可见到聚集成团的针形羟基磷灰石结晶(图2) 。羟基磷灰石结晶的长轴与胶原的长轴一致,并且沿胶原的长轴分布。大量钙盐沉积在胶原上,可以掩盖胶原的周期性横纹。
212 　软骨细胞和软骨基质　一些软骨细胞的周围有钙盐沉积,形成类骨质。类骨质内的软骨细胞出现固缩和变形,其周围看见基质小泡(图3) 。
此文转载于《中国骨伤》伤2000 年10 月第13 卷第10 期
作者：常超英　刘恩

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