Board logo

标题: 求助~求助~免疫组化结果 [打印本页]

作者: yyhzhouying0908    时间: 2011-6-4 20:27     标题: 求助~求助~免疫组化结果

[code][/code]首先,灌注大鼠,500ML生理盐水。300ML4%多聚甲醛,心脏灌流,右心房插入,打开生理盐水,剪开左心耳。30%蔗糖溶液沉底,冰冻切片机,切片



1. 切片用PBS漂洗3次,10min
2. 切片移至3%过氧化氢溶液中,10min
3. PBS漂洗3次,10min
4. 切片浸入3%正常羊血清蛋白(BSA)溶液中,37℃,30min
5. 切片置入一抗4℃冰箱过夜
6. 切片用PBS漂洗3次,每次10min
7. 切片移至二抗, 37℃,30min
8. PBS漂洗3次,每次10min
9. dab显色 10min
10. PBS漂洗3次,每次10min
11. 贴片,干燥
12. 逐级酒精脱水(80%,90%,95%,100%х2每次15min),透明(二甲苯15minх2)树胶封片,晾干
使用的抗体是MILLIPORE的~~~多巴胺受体

http://www.millipore.com/catalogue/item/abn20



最近,每次试验最后的片子都有很多这种弯曲的非特异性物质。
作者: yyhzhouying0908    时间: 2011-6-5 13:17

看到了,上图了,,,
很多人告诉我不是血管,但是也不知道是什么,请您帮我分析一下,谢谢您了
作者: xkj2797xkj    时间: 2011-6-5 14:26

会不会是你切片上组织的皱褶!
作者: yyhzhouying0908    时间: 2011-6-5 22:12     标题: 回复 7# 的帖子

我在想,会不会是不是我每次盐水冲的多了,我每次都冲500ML的盐水
作者: shanghainese    时间: 2011-6-6 10:49

引用:
原帖由 xkj2797xkj 于 2011-6-5 14:26 发表
会不会是你切片上组织的皱褶!
与其说是皱褶, 不如说是小虫虫。
作者: shanghainese    时间: 2011-6-6 10:52

引用:
原帖由 yyhzhouying0908 于 2011-6-5 13:17 发表
看到了,上图了,,,
很多人告诉我不是血管,但是也不知道是什么,请您帮我分析一下,谢谢您了
是血管。
有没有设立isotype control?
在isotype control 上是不是也这样?
作者: xkj2797xkj    时间: 2011-6-6 12:59

引用:
原帖由 shanghainese 于 2011-6-6 10:49 发表

与其说是皱褶, 不如说是小虫虫。
无知!
作者: xkj2797xkj    时间: 2011-6-6 13:00

引用:
原帖由 shanghainese 于 2011-6-6 10:52 发表

是血管。
有没有设立isotype control?
在isotype control 上是不是也这样?
真无知!

作者: xkj2797xkj    时间: 2011-6-6 13:01

引用:
原帖由 shanghainese 于 2011-6-6 10:52 发表

是血管。
有没有设立isotype control?
在isotype control 上是不是也这样?
你以为是你在做CD34?
作者: yyhzhouying0908    时间: 2011-6-6 22:05     标题: 回复 13# 的帖子

那请问是什么呢?
作者: shanghainese    时间: 2011-6-7 14:02

引用:
原帖由 yyhzhouying0908 于 2011-6-6 22:05 发表
那请问是什么呢?
大家都想知道是什么呢?
请十三楼说说答案.
作者: yyhzhouying0908    时间: 2011-6-7 20:06

为了排除一些原因


改图是没有做任何染色处理

30%蔗糖沉底后,直接冰冻切片的结果
除了气泡以外,能看到很多透明的絮状物~~~
请问高手,
你们都遇到过嘛
到底是什么啊
求解
作者: shanghainese    时间: 2011-6-7 21:40

引用:
原帖由 yyhzhouying0908 于 2011-6-7 20:06 发表
为了排除一些原因


改图是没有做任何染色处理

30%蔗糖沉底后,直接冰冻切片的结果
除了气泡以外,能看到很多透明的絮状物~~~
请问高手,
你们都遇到过嘛
到底是什么啊
求解
让我们看看 isotype control 的照片。




欢迎光临 中华病理技术论坛 (http://bbs.zhbljs.com/bbs/) Powered by Discuz! 6.0.0