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标题: 简便实用的快速冷冻切片固定剂(转载) [打印本页]

作者: 九日    时间: 2011-6-5 22:44     标题: 简便实用的快速冷冻切片固定剂(转载)

1. 1. 3配方 丙酮85 ml, 甲醛10 ml, 冰醋酸5 ml。
1. 1. 4 设备 LeicaCM1900 冰冻切片机、PanasonicEH5251 电
吹风。
1. 2 方法新鲜组织块以OCT 冷冻包埋剂包埋, 置冷冻切片机速冻台冷冻至适宜硬度( 冷冻时间不超过1 min) , 以5~ 8 m厚度连续切片, 每个标本切两张切片, 其中一张不固定而直接染色封片, 另一张切片用电吹风低温档将切片稍烘干然后放入固定液中固定2~ 4 min( 视切片厚度而定) , 之后, 取出切片进行常规HE 染色、封片、镜检。冷冻切片后剩下的组织块待自然恢复室温后作常规固定、脱水、石蜡包埋切片, 同样经常规HE染色后封片镜检。
2  结果
2. 1未经固定处理的冷冻切片细胞结构欠清晰, 细胞核染色质结构较模糊; 经固定处理后的冷冻切片着色鲜明, 细胞核、浆清晰, 结构分明, 与常规石蜡切片较接近。此文转载于《实用预防医学》2007 年10 月第14 卷第5 期
作者:杨 军
作者: dingwei    时间: 2011-7-1 09:11

丙酮固定细胞收缩大,不造成用。
作者: xkj2797xkj    时间: 2011-7-2 21:16

引用:
原帖由 dingwei 于 2011-7-1 09:11 发表
丙酮固定细胞收缩大,不造成用。
冰醋酸能对抗丙酮的收缩作用!冰冻切片不建议用丙酮做固定作用。
上述的固定与不固定本人也专门试验过,的确,未经固定的组织的细胞染色结构不是很清楚,而且伊红染色会不好!
再者丙酮能够使蛋白质沉淀,渗透力强,但是对细胞核固定欠佳!对糖原无固定作用!
作者: 刹那公子    时间: 2011-7-5 23:19

我们的固定液是乙醚和传统(乙醇加冰醋酸)两种,试验过,区别不太大,正好想请教下老师,哪种适用?或者不同组织适用不同的固定液?
作者: xkj2797xkj    时间: 2011-7-5 23:52

我们冰冻切片固定液是95乙醇!
作者: 强子    时间: 2011-7-6 11:46

95%乙醇  挺好用,另外我想问问大家都用包埋剂吗?有不用的没
作者: 刹那公子    时间: 2011-7-6 12:20

有时候不是很重要的标本,如肌瘤之类的,我们用胶水。或者把组织切大点,什么都不用。
作者: xkj2797xkj    时间: 2011-7-6 20:00

用胶水也可以,不用也可以,我切的时候基本不用,直接冰冻就切!




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