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标题: 请问各位老师冰冻切片细胞结构糊涂不清是何原因 [打印本页]

作者: yuyanting0526 时间: 2011-6-26 21:54 标题: 请问各位老师冰冻切片细胞结构糊涂不清是何原因

一是冰冻切片结构糊涂不清二是冰冻切片染色红蓝对比如何更清楚防止过度分化三是有关冰冻切片冷冻固定时间总之怎么才能把切片质量提上去
我们单位的苏木素和伊红都是购买而来不自己配置，有一次因为苏木素质量不好而出的片子不好！！请问老师买来的苏木素和伊红怎么判断他们的质量好与不好谢谢老师们！

作者: ChenRong 时间: 2011-7-3 22:39

1，【冰冻切片结构糊涂不清】是固定有问题，我用的比较偷懒的办法，直接95%酒精，放个10秒吧，切好马上放入，不然结构就有破坏。
2，【染色红蓝对比如何更清楚】应该和你染色的关系，当然前面固定不好也会有点影响，我一般固定水洗，然后苏木素2分钟到3分钟，水洗分化，兰化，在95%酒精去水，进入伊红马上提出进梯度酒精。冰冻时伊红时间不能长，长了很容易过染。
最好的苏木素是自己配的，当然是材料要好，自己的火候要好。

作者: aaking120 时间: 2011-7-4 10:39

1，及时固定，待切片完成后迅速放到固定液中固定，我用的固定液85ml75%酒精+10ml甲醛+5ml冰醋酸，效果还行。切片完成到固定的时间越短越好，你可以切两个面，一个切好放到机箱外，再切另一个面，在同一张玻片上，可以看下效果
2，对比鲜艳，如果不是自己配的苏木素，在充分水洗后，在苏木素的时间可以适当延长一些，记得充分水洗，然后水冲，分化液力度大一些，，然后再充分水洗，尽可能去点分化液，在蓝化液中蓝化，时间也可以长一些，充分水洗，再染伊红，染色我觉得还是水冲洗的时间和染色时间的控制。一定要充分水洗
3，关于切片，告诉取材人员组织大小要合适，个人觉得，先打好胶水，然后放到机箱中冷冻，待组织周围胶水发白时，理解放下冻头，大概近一分钟可以切片，为什么不打好胶水立即用冻头冷冻呢？1，组织变形，2囊壁组织可能影响切面3冷冻时间不好把握，防止冷冻过度，或者冷冻未够，增加切片时间等等

都是个人意见哈，如果有错误的地方请指出，一起学习哈

作者: gagawow 时间: 2011-7-26 21:57

同意楼上。AAF固定液，及时固定，水洗充分，染色适当，关于楼上的包埋方法，我在一本病理杂志上看过，说效果好，等胶水发白快完全冻好的时候再用冻锤。

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