标题:
请教：Masson染色全变成蓝色的原因
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作者:
llj19971997
时间:
2011-7-9 06:18
标题:
请教：Masson染色全变成蓝色的原因
最近一直在做Masson染色：
使用的即本网站的方法。最初做的很好，出来的片子颜色鲜明，对比度好，该红的红，该蓝的蓝。
后来又做了几张片子，出现红色一入磷钼酸就掉色特别厉害的现象。我感觉是酸性品红的原因。
现在面临着一个困惑：
为什么有的片子对比度好，有的片子整体都变成了蓝色？（感觉蓝色将红色覆盖了）
那就说明我的试剂没有问题。问题出在哪里呢？
做Masson染色，到底是哪一步导致了这种现象的发生？
请大家帮助！
作者:
xkj2797xkj
时间:
2011-7-13 00:14
Masson三色染色法
试剂配制：
（1）丽春红酸性品红液：
丽春红 0.7g
酸性品红 0.3g
冰醋酸 1ml
蒸馏水 99ml
先配好1%醋酸溶液后，分别溶解丽春红或酸性品红。
（2）亮绿液：
亮绿 1g
冰醋酸 1ml
蒸馏水 99ml
（3）苯胺蓝液：
苯胺蓝 2g
冰醋酸 2ml
蒸馏水加至 100ml
（4）Weigert铁苏木素液：
甲液：苏木素 1g
95%酒精或无水酒精 100ml
乙液：29%三氯化铁水溶液 4ml
纯盐酸 1ml
蒸馏水 95ml
临用前取甲、乙两液混合即可，24小时内使用有效。
染色步骤：
1、切片脱蜡至蒸馏水
2、Weigert铁苏木素染色5-10分钟
3、流水稍洗
4、盐酸酒精分化
5、流水冲洗数分钟
6、丽春红酸性品红液染色5分钟
7、蒸馏水稍冲洗
8、1%磷钼酸水溶液处理5分钟，可在显微镜控制下见肌肉纤维呈红色，胶原
纤维呈淡红色即可
9、不经过水洗，直接用苯胺蓝液或亮绿液染5分钟
10、1%冰醋酸处理1分钟
11、95%酒精、无水酒精脱水
12、中性树胶封固
染色结果：
胶原纤维呈蓝色（苯胺蓝染）或绿色（亮绿染），肌纤维、细胞质和红细胞
呈红色，细胞核呈蓝褐色。
注意事项：
每个步骤可在镜下控制染色效果
（试试这个，此法为教材标准上的！）
作者:
histotechnology
时间:
2011-7-13 08:31
标题:
回复 1# 的帖子
要不丽春红染的不好，要不就是在1%磷钼酸中分化时间过长。
作者:
llj19971997
时间:
2011-7-13 12:48
我是做大鼠肺组织masson。有的片子很好染，时间长点短点都很漂亮。有的就不行,同一批的肺组织切片不会出现相同的效果，不像HE那么好控制。不知道是什么原因。
染得过程中，我觉得好像丽春红确实着色淡，效果就很不好。
作者:
llj19971997
时间:
2011-7-18 15:56
现在我掌握masson染色技术了。
作者:
xkj2797xkj
时间:
2011-7-18 21:12
呵呵，特染其实是很简单的，多注意操作的注意事项！
作者:
weili1027
时间:
2011-7-28 21:37
我之前也做masson，也是染出来就一片蓝色，红色的就只有一点，这是怎么回事呢
作者:
祝祝
时间:
2011-9-2 12:30
标题:
求助：masson染色 底色偏蓝
你好，我想请问一下你上述的问题解决了没？我是新手，最近也在做小鼠肺组织的masson染色，也老是出现底色偏蓝的现象，若你已经解决的话，麻烦可不可以告诉我你的解决方案啊？不胜感激！
作者:
llj19971997
时间:
2011-9-2 20:24
方法和书上说的一样。只不过我觉得染色时间得自己把握。具体的时间我都是在显微镜下控制的。每一步的颜色，我都会在显微镜下看一下。结果就不错的。颜色很鲜艳，红蓝对比很清晰。
声明：我也是没人教，自己摸索着做的。也是按书上一步一步做。因此以上经验仅供参考。
作者:
likailing
时间:
2011-9-2 21:57
标题:
求帮助
哪位老师能给我介绍本初级技师的考试书籍！
作者:
祝祝
时间:
2011-9-2 23:37
呵呵，多谢赐教啊！！
作者:
ylzhao
时间:
2011-10-5 19:49
缩短磷钼酸的染色时间，3分钟试试，这一步红色脱得很厉害。另外苏木精不要过染，分化到背景无色。
作者:
daixiaobo
时间:
2011-11-8 08:58
标题:
11
11
作者:
寻找生命的奇迹
时间:
2011-11-17 21:52
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作者:
ylzhao
时间:
2011-11-19 21:07
标题:
回复 14# 的帖子
本人觉得没有什么疑问。胶原和肌肉很明确。
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