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标题: [求助]关于脱水的问题? [打印本页]

作者: wenhaibin    时间: 2003-8-28 20:28     标题: [求助]关于脱水的问题?

各位老师:
     以下是我们的脱水程序,各位可否指点一下?我们的片子很难切,发脆,切下都不完整.
1.AF  17:30-21:30      4H
2.80%酒精 21:30-23:30   2H
3.95%酒精 23:30-24:30   1H
4.95%酒精 24:30-1:30    1H
5.100%酒精 1:30-2:30    1H
6.100%酒精 2:30-3:30    1H
7.丙酮     3:30-4:00    0.5H
8.二甲苯   4:00-4:30    0.5H
9.二甲苯   4:30-5:00    05.H
10.石蜡    5:00-6:00    1H
11.石蜡    6:00-7:00     1H
12.石蜡    7:00-8:30      1.5H

作者: 中威先生    时间: 2003-8-29 10:38     标题: [求助]关于脱水的问题?

既然组织发脆,最好是去掉丙酮,在第二道后加80~85%酒精一道.
1.AF液            4H
2.80%酒精         2H
3.85%酒精         2H
4.95%酒精         2H
5.95%酒精         1.5H
6.100%酒精        1H
7.100%酒精        1H
8.二甲苯          0.5H
9.二甲苯          0.5H
10.石蜡           0.5H
11.石蜡           1.5H
12.石蜡           2H
先试看看,有什么问题再来这里讨论。


作者: wenhaibin    时间: 2003-8-31 15:05     标题: [求助]关于脱水的问题?

谢谢丁伟老师,谢谢中威先生.我试过后再告知二位.
作者: dingwei    时间: 2003-8-31 20:48     标题: [求助]关于脱水的问题?

很奇怪,上面脱水方案的不是我回答的,不知谁用了我的密码,代我回答了,也可能谁用了我用过的计算机,有密码保存。
现我回答如下:
脱水时间太短了一点:
1.10%福马林            4H
2.水洗               0.5H
3.80%酒精              2H
4.95%酒精              2H
5.95%酒精              2H
6.100%酒精           1.5H
7.100%酒精             2H
8.二甲苯             0.5H
9.二甲苯             0.5H
10.石蜡              0.5H
11.石蜡              1.5H
12.石蜡                2H
    你试一下。

作者: 阿拉丁    时间: 2003-9-22 18:48     标题: [求助]关于脱水的问题?

恩,个人认为在95%的酒精里停留的时间一定要够。

作者: 窗花    时间: 2003-9-29 19:54     标题: [求助]关于脱水的问题?

不要再用丙酮了吧
作者: pianpian    时间: 2003-10-29 21:45     标题: [求助]关于脱水的问题?

我正准备做石蜡切片,收集了一些资料,其中透明,渗蜡过程都是逐级进行的,为何各位的方法都是直接百分百置换?还有一个问题请教:固定后的逐级脱水时间长短如何确定?我是做植物组织切片的,好象每次是30分钟左右,有没有不同组织的经验值啊?
作者: huizhou    时间: 2003-11-11 01:13     标题: [求助]关于脱水的问题?

我通常是这样的:50%酒精45分钟
               70%酒精45分钟
               95%酒精45分钟
               100%酒精45分钟
               100%酒精45分钟
               100%酒精45分钟
               二甲苯45分钟
               二甲苯45分钟
               二甲苯45分钟
效果还可以
作者: huizhou    时间: 2003-11-11 01:15     标题: [求助]关于脱水的问题?

我通常是这样的:50%酒精45分钟
               70%酒精45分钟
               95%酒精45分钟
               100%酒精45分钟
               100%酒精45分钟
               100%酒精45分钟
               二甲苯45分钟
               二甲苯45分钟
               二甲苯45分钟  
               石蜡1小时
                石蜡1小时
效果还可以
作者: sprac    时间: 2003-11-12 10:14     标题: [求助]关于脱水的问题?

二甲苯这么长时间,不会发脆吗,组织块有多厚阿?
作者: 蓝宝石    时间: 2006-8-31 19:56

酒精到二甲苯不要一个酒精和二甲苯混合液过度吗?
作者: wjx    时间: 2006-9-7 20:33

脱水时间的长短与试剂的用量和组织块的多少相关,建议去掉丙酮,第一缸酒精的浓度用70%。
作者: colin    时间: 2006-9-7 22:16

大家不妨试一试用硬脂酸代替二甲苯!我们在浸蜡的时候把硬脂酸直接加到蜡里面,一起就可以了,做的片子还可以!脱水和丁老师的差不多了!
效果还可以吧!
作者: xiaoxishuai    时间: 2006-9-11 10:40

个人觉得二甲苯的世间有些过长,我一般都在100%酒精到二甲苯之间加一步 1:1的酒精:二甲苯过渡一下,大约1h左右,然后二甲苯20分钟
                                    二甲苯20分钟(共两部)。效果不错。
作者: anseng    时间: 2006-9-14 19:15

为什么要三个蜡缸?请教。。




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