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标题: 讨论一下：为何细胞涂片用酒精固定不容易脱片？ [打印本页]

作者: 王华 时间: 2011-11-16 20:44 标题: 讨论一下：为何细胞涂片用酒精固定不容易脱片？

有一个经常发生的现象不知大家曾经仔细观察并思考过原因没有：
用95%酒精固定的组织切片与甲醛固定的组织切片有什么不同？
酒精固定的组织切片出现胞浆胞核“一边倒”的现象是什么原因？
如果把这个问题想清楚了，也会明白为啥细胞涂片用酒精固定不会脱片了。

如果用别的固定剂固定细胞，如何做到不掉片呢？

开动脑筋思考一下，脑子是越用越灵活的哟！

作者: dingwei 时间: 2011-11-17 07:49

很好的问题，我一直就是只知其现象，不知其原因。

作者: guting2006 时间: 2011-11-17 09:43

是不是和酒精是还原剂有关啊？不会和组织蛋白质发生交联，不破坏组织与玻片之间的结合？不是很了解，请赐教

[ 本帖最后由 guting2006 于 2011-11-17 09:46 编辑 ]

作者: 王华 时间: 2011-11-17 12:18

我觉得应该先考虑下面这个问题：
酒精固定的组织切片出现胞浆胞核“一边倒”的现象，胞浆胞核倒向那一边？为什么？

作者: dingwei 时间: 2011-11-17 14:54

酒精固定的组织切片出现胞浆胞核“一边倒”的现象? 这我一直没发现，今天仔细看了酒精固定的切片，也没这种感觉，能否用图说明？谢谢。我感觉酒精固定的差异在核染色质：不均匀、常不规则聚集在核膜周围，经常会出现核中染色质空白区。

作者: 天涯无风 时间: 2011-11-17 20:17

第一：酒精固定的原理是使蛋白质发生沉淀聚集，所以切片在固定的时候，核作为一个整体往往会由于重力的作用而偏向一方。
第二：会不会脱片应该跟涂片的厚薄、细胞的粘附力、固定时间的长短有关系，酒精由于固定迅速，所以一般在短时间内就不那么容易脱片了，如果延长时间，福尔马林的效果应该是一样的。

作者: 王华 时间: 2011-11-17 20:26

图片现在暂时没有，要等回科室才能找来拍拍啦。

“酒精固定的差异在核染色质：不均匀、常不规则聚集在核膜周围，经常会出现核中染色质空白区”也是酒精固定的特点。
如果是酒精固定的组织，在组织外周的边缘的细胞会出现一种胞浆胞核向中央“偏向”的现象，特别是一些细胞大的组织，如肝组织等，这种现象会更明显。
组织中央就不明显了。
这种“偏向”现象在细胞涂片是看不到的。

在我们医院，有时外科门诊的医生会用酒精固定外科标本或肝穿组织，显微镜下一看就知道是酒精固定的，逃不出俺的“火眼金睛”啦！

[ 本帖最后由王华于 2011-11-17 20:40 编辑 ]

作者: 王华 时间: 2011-11-17 20:51 标题: 回复 6# 的帖子

我觉得应该从酒精固定的原理出发，思考一下酒精对组织和细胞中的各种分子的作用，更能理解问题！

印度心灵大师克里希那穆提说：“如果对问题有深入的理解，答案就会出来了”。

[ 本帖最后由王华于 2011-11-17 21:02 编辑 ]

作者: dingwei 时间: 2011-11-17 22:12

用95%酒精固定的组织边缘有一圈细胞明显收缩的组织带，特别是小标本。这也是蛋白质碰到高浓度酒精发生凝固的特点吧

作者: 王华 时间: 2011-11-17 23:19

95%酒精和75%酒精固定的效果一样吗？

作者: myzh 时间: 2011-12-22 11:21 标题: 回复 10# 的帖子

我也想知道

作者: xiaoniou777 时间: 2011-12-22 22:06 标题: 回复 10# 的帖子

我想可能不会一样，因为酒精浓度不一样对细胞的穿透力也会不一样吧？

作者: xiaoniou777 时间: 2011-12-22 22:07 标题: 回复 10# 的帖子

我想可能不会一样，因为酒精浓度不一样对细胞的穿透力也会不一样吧？

作者: shanghainese 时间: 2011-12-24 13:36

最好大家把照片传上来。

作者: highsky 时间: 2012-2-6 16:59

对诊断结果有影响么？

作者: flyaqmt 时间: 2012-2-7 10:39

学习，盼答案

作者: 大志 时间: 2012-2-8 22:50

关注中

作者: hx362788806 时间: 2012-3-10 14:24

用95%酒精固定加点冰醋酸就没有收缩带了

作者: willfirm 时间: 2012-8-19 00:08

这个。。。。有点意思哦持续关注此贴

作者: 泡泡泡芙88 时间: 2012-8-20 20:23

老师讲一下吧，好想知道

作者: 小钟 时间: 2012-9-27 22:50

95%酒精固定常规标本不太适合吧！95的酒精对组织的收缩硬化组织比较强，能迅速在组织表面形成一个比较硬的保护壳，如果组织稍微厚点就会导致固定脱水不彻底，还会阻止后面液体进入组织

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