标题:
做肝脏组织病理切片时，组织总切碎，请教高手指点
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作者:
霹雳狂风
时间:
2011-11-27 00:04
标题:
做肝脏组织病理切片时，组织总切碎，请教高手指点
做病理切片步骤：
1﹚取材和固定 取 1×1×0.5cm 大小的肝脏组织标本，立即置于 4％多聚甲醛中固定。
2﹚冲洗 标本固定24h后，流水冲洗24h
3﹚脱水 将标本经80％酒精→95％酒精（Ⅰ）→95％酒精(Ⅱ)→无水酒精（Ⅰ）→无水酒精（Ⅱ），各级酒精90min。
4﹚透明 将脱水后的标本二甲苯(Ⅰ）→二甲苯（Ⅱ）→二甲苯（Ⅲ），各级时间20min 左右
5﹚浸蜡 把含有肝脏组织的包埋盒放在熔蜡箱内，并使熔蜡箱的温度保持恒定（约 60℃），时间约为3h
6﹚包埋
7）切片
切片时组织总碎，如下图，想请教高手指教！谢谢
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本帖最后由 霹雳狂风 于 2011-11-27 19:09 编辑
]
作者:
xkj2797xkj
时间:
2011-11-27 10:04
脱水程序设计不合理，脱水过了！
作者:
dahhs
时间:
2011-11-27 18:16
无水的时间90min太多了, 试一试95%1h ,无水1h
作者:
Tony
时间:
2011-11-27 18:17
why use paraformadyhide fix ?paraformadyhide is used for fix tissues for electric microscope.
作者:
霹雳狂风
时间:
2011-11-27 19:03
标题:
回复 3# 的帖子
你好，你看我其他的步骤有问题吗？脱水、透明、浸蜡？
作者:
ChenRong
时间:
2011-11-29 19:14
首先，我不知道你的是研究还是日常病理切片
组织能否薄点，在0.2-0.3左右
然后酒精时间都减掉30分钟
接着问题是，你的二甲苯是加温的还是不加温的，你说浸蜡需要放在溶蜡炉里，估计二甲苯不加温的，所以你的二甲苯在常温中基本3缸都放30分钟，中间可以拿出来观察下是否组织透明了，没有透明时间还可以延长，然后放入蜡中。
还有前面你的固定前面是否已经固定了，就是肝组织活体下来后是否及时切开固定。
具体问题其实还要靠自己摸索
作者:
霹雳狂风
时间:
2011-11-30 09:21
标题:
回复 6# 的帖子
你好，我做的是大鼠的研究，肝脏组织我在10％多聚甲醛中固定24h。谢谢版主!
作者:
blktyw
时间:
2011-11-30 14:09
酒精、二甲苯及石蜡处理时间有点chang
作者:
王渝
时间:
2011-12-4 23:32
主要是脱水时间过长，尤其是高浓度酒精，建议缩短高浓度酒精的时间
作者:
lyd908149365
时间:
2011-12-7 16:16
标题:
回复 1# 的帖子
刀快么？切之前冰一下，切时 轻轻吹着腊块 试试
作者:
wxm1117
时间:
2012-1-9 23:48
顶一个。好
作者:
chinasunmoon
时间:
2012-4-24 15:46
脱水 将标本经80％酒精10小时→95％酒精（Ⅰ）1.5小时→95％酒精(Ⅱ)1小时→无水酒精（Ⅰ）30分钟→无水酒精（Ⅱ）30分钟。
4﹚透明 将脱水后的标本二甲苯(Ⅰ）10分钟→二甲苯（Ⅱ）20分钟→二甲苯（Ⅲ）根据实际，用眼看一下是否透明，然后再入蜡中。
5﹚浸蜡 把含有肝脏组织的包埋盒放在熔蜡箱内，并使熔蜡箱的温度保持恒定（约 60℃），时间约为蜡(1) 30分钟，蜡(2)1.5小时，蜡(3)2小时。
(6)切片厚度在0.4，不要冻的太很。看一下怎样。
作者:
phx6346
时间:
2012-4-25 10:27
我做的大鼠脱水程序如下：75% 50min→85% 50min→95% 40min →95% 40min→ 100% 30imn →100% 30min →二甲苯10min→二甲苯5min→石蜡20min→石蜡40min→石蜡1.5h
肝脏在粗修时会有碎末，细修时注意速度，不要太快，最好切3微米，冰冻时间不要太长。镜下效果挺好的，没有裂隙。你可以试试，我用的是国产的脱水机。
作者:
phx6346
时间:
2012-4-25 10:37
你这张图，明显的刀也不行了，估计也没冰好，组织就算处理得好，也是切不出来的。这个程序吧，关键在于自己的摸索，结合自己科室的情况，毕竟所用的仪器不一样，而且试剂缸所容纳的试剂也不同，时间长短自然不同，希望你一切顺利，全是个人的看法哈，不是专家。
作者:
ddyyff559
时间:
2012-5-8 18:15
其实不难，有经验的老技术员一点即可！
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