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标题: 怎样去除细胞内黑色素 [打印本页]

作者: castle1979 时间: 2012-1-17 21:18 标题: 怎样去除细胞内黑色素

有例考虑转移恶黑病例需做免疫组化，但自身黑色素相当严重，估计DAB显色后难以区分，如何褪去自身黑色素，AEC显色不考虑，谢谢！

作者: ChenRong 时间: 2012-1-17 23:32

先高锰酸钾滴染5-10分钟，洗掉，在用草酸滴染，注意：草酸滴染后很容易使得组织细胞溶解
两者的浓度我还一时想不起来了，明天到了单位给你看下

作者: ChenRong 时间: 2012-1-20 09:07

0.5%高锰酸钾
1%草酸

作者: flyaqmt 时间: 2012-1-20 09:59

我原来发过一个有关黑色素复染的帖子，怎么找不到了呢？

作者: flyaqmt 时间: 2012-1-20 10:07

1，常规免疫组化染色，显色完成后，水洗。
2.加Giemsa工作液染20-30分钟，水洗（工作液：Giemsa原液用0.1mol/L PBS 1：10稀释）
3.用1：500冰醋酸分化到黑色素细胞呈绿色为止，水洗
4.复染苏木素30秒，1%盐酸酒精分化，返蓝，水洗，脱水，透明，树胶封片。
在工作中常碰到黑色素肿瘤需免疫组化，所以可以配一些Giemsa原液备用。可以临床与实验病理学杂志 1996年3月：12（2）查到，题目：Giemsa染色在黑色素细胞病变免疫组化复染中应用。

作者: flyaqmt 时间: 2012-1-20 10:31

1.染液配制

（1）Giemsa原液：除可按病理染色技术书籍中介绍的常规配方比例配制外，因滴染所需染液量较少，我们采用以下配制比例：Giemsa粉0.5g、甘油33ml、甲醇33ml，配制过程同常规

（2）Giemsa工作液：Giemsa原液用0.1mol/L的PBS按1：10稀释。

2.染色步骤

（1）切片常规脱蜡至水，按免疫组化染色常规步骤进行到DAB显色，水洗

（2）滴加Giemsa工作液，应全部覆盖组织，室温20-30分钟，水洗

（3）用1：500冰醋酸分化，注意随时用显微镜观察，至黑色素呈绿色时终止

（4）迅速常规苏木素复染，脱水、透明、封片。

黑色素呈绿色，而免疫组化阳性为棕黄色。

作者: castle1979 时间: 2012-1-28 18:50

非常感谢2位版主的热心回复，给2位版主拜个晚年

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