中华病理技术论坛 - Powered by Discuz! Board

标题: 常用HE试剂配制 [打印本页]

作者: DINGWEI 时间: 2002-1-14 23:41 标题: 常用HE试剂配制

[这个贴子最后由dingwei在 2003/01/09 10:39pm 编辑]

                              常用HE试剂配制
一、苏木素
(1) Harris苏木素:
      配方：
      苏木素    1 g          无水乙醇       10 ml
      蒸馏水    200 ml       钾明矾          20 g
      HgO       0.5 g
先将苏木素溶于无水乙醇中，备用。把明矾放入蒸馏水，加热溶解，再加入备用的苏木素，煮沸 2 分钟，先加入少量的氧化汞，防止氧化过程中苏木素外溢，玻棒搅拌，然后，边搅拌边加入氧化汞。加完后，立即移至冰水中，加速其冷却，静置一夜后，过滤。用前以 5% 的比例加入冰醋酸。如配好后时间较长，冰醋酸的量可适当多加一点。冰醋酸的量，可直接影响苏木素的着色能力和清晰度。加少了，会造成核浆共染，背景不干净；加多了，核着色能力下降。此液可放置3月至半年左右，视气温而定。使用期要看染色的切片量来定：以每天100张片的量，可使用半个月左右。
（2）Gill改良苏木素液
   苏木精    2  g          无水酒精    250 ml
   硫酸铝    17.6 g          蒸馏水    750 ml
   碘酸钠    0.2 g          冰醋酸    20  ml
先将苏木精溶于无水酒精,硫酸铝溶于蒸馏水,然后两液混合后加入碘酸钠,最后加入冰醋酸。此液为半氧化苏木素液，不会产生沉淀，氧化膜少。是进行性染色的配方，不用分化，染色时间在4-10分钟左右，效果很好。特别适用于染色机染色。

二、伊红
（1）伊红（水溶性）
配方：
伊红（水溶性）       2.5-5 g
蒸馏水                500 ml
将水溶性伊红溶于蒸馏水中，然后加浓盐酸10毫升，充分搅拌，静置过夜后过滤。过滤后的沉淀用蒸馏水冲洗二次，再过滤；将沉淀物连同滤纸一起放入温箱内干燥，加95%酒精1000毫升，配成饱和液。使用前再用95%的酒精 1:1～2倍稀释，加入1～2%冰醋酸。
此方法具有染色时间快，颜色鲜艳，不容易褪色，使用寿命长等特点。
（2）伊红（醇溶性）
   配方：
伊红（醇溶性）       2.5-5g
75%酒精             1000 ml
加几滴冰醋酸至半透明状。

三、固定液：
（1）12%中性福尔马林（pH7.0）
甲醛             120 ml
NaH2PO4·H2O    4 g
Na2HPO4          13 g
蒸馏水          880 ml
（2）12%酸性福尔马林（PH 4.5）
甲醛                120 ml
水                830 ml
冰醋酸             50  ml
（3）12%福尔马林
甲醛                120 ml
水                880 ml

（4） Bouin 固定液
饱和苦味酸             75  ml
甲醛                   25  ml
冰醋酸                5  ml
四、盐酸酒精分化液：
　　　　　浓盐酸　　　　　　　　0.5～1 ml
　　　　　75%酒精　　　　　　　　　99 ml

作者: 可乐猫 时间: 2003-1-3 00:43 标题: 常用HE试剂配制

最关键的那一步你还没说呢，加氧化汞时是在液体沸腾时加吗？还是先撤火再加，每次做到这一步时我都有些担心怕掌握不好加入的时机，和危险性。

作者: dingwei 时间: 2003-1-3 21:54 标题: 常用HE试剂配制

氧化汞时是在液体沸腾时加,先加一点点，然后再略多一点，只要不沸出就行，边加边搅拌，加完后立即移至冰水中，加速其冷却。

作者: sissi123 时间: 2003-1-15 23:31 标题: 常用HE试剂配制

为什么加完氧化汞后要立即移至冰水中，一般是用玻璃器皿配液，那器皿不会破碎吗？
如果自然冷却有什么不好？

作者: ketty 时间: 2003-1-16 20:03 标题: 常用HE试剂配制

引用:

下面引用由sissi123在 2003/01/15 11:31pm 发表的内容：
为什么加完氧化汞后要立即移至冰水中，一般是用玻璃器皿配液，那器皿不会破碎吗？
如果自然冷却有什么不好？

器皿不会破碎的，自然冷却的效果没有立即冷却的好。冷却的目的是不让氧化汞氧化过了。
其实不及着用的话，不加氧化汞也行。待苏木素自然氧化。[室温不同，氧化的时间也不同，一般需要三个月左右，用前过滤加冰醋酸。这种方法用的时间比较长]

作者: chenrong 时间: 2003-1-17 17:31 标题: 常用HE试剂配制

引用:

下面引用由wzy在 2003/01/17 10:08am 发表的内容：
配1000ml的染液，用3000ml的锥形瓶就不会溢出。

嗯,同意!
和我一样. :em17: :em17:

作者: 雪兔 时间: 2003-1-17 21:31 标题: 常用HE试剂配制

如果配出的沉淀多，是怎么回事？是不是加氧化汞的时候太快了？

作者: maomyzhu 时间: 2003-1-18 21:45 标题: 常用HE试剂配制

请问:加氧化汞一点点.这一点点是多少.可不可以量化?

作者: 王海军 时间: 2003-1-21 20:38 标题: 常用HE试剂配制

半氧化苏木素氧化汞加常规量的一半甚至1/3即可。

作者: ice 时间: 2003-1-24 08:34 标题: 常用HE试剂配制

其实我曾看到过好几篇关于改良Harris苏木素的配方了，好象大家的意见还不太一致.有的侧重在量上的改变，有的侧重在配置时时间的掌握及温度的控制。究竟怎样的才是最好的?

作者: weice 时间: 2003-2-17 21:54 标题: 常用HE试剂配制

引用:

下面引用由雪兔在 2003/01/17 09:31pm 发表的内容：
如果配出的沉淀多，是怎么回事？是不是加氧化汞的时候太快了？

作者: ketty 时间: 2003-2-22 22:23 标题: 常用HE试剂配制

引用:

下面引用由weice在 2003/02/17 09:54pm 发表的内容：

加的太早了。

作者: wdp2002 时间: 2003-3-13 18:21 标题: 常用HE试剂配制

配的时候用大瓶子，你就放心的往里加氧化汞吧，不要害怕。但也要缓缓的，断断续续的往里倒，每次我都很顺利的倒了进去。

作者: wdp2002 时间: 2003-4-13 18:22 标题: 常用HE试剂配制

烧杯都是熟玻璃做的，不用担心炸裂，大胆的往冷水里放

作者: 姚松涛 时间: 2003-4-14 20:54 标题: 常用HE试剂配制

我也是这样认为的,倒氧化汞的时候,分多次加完,不会溢出.

作者: 雪洁 时间: 2003-4-17 20:51 标题: 常用HE试剂配制

[这个贴子最后由雪洁在 2003/04/17 08:53pm 编辑]

引用:

下面引用由雪兔在 2003/01/17 09:31pm 发表的内容：
如果配出的沉淀多，是怎么回事？是不是加氧化汞的时候太快了？

我想那沉淀物是配制中的饱和明矾吧。。。怎样解决这个沉淀问题，过滤。

作者: 武器 时间: 2003-5-5 20:34 标题: 常用HE试剂配制

配置苏木素过程中的《静置一夜后，过滤。用前以 5% 的比例加入冰醋酸。》，是取滤液用还是取沉淀用？

作者: xiaohuadog 时间: 2003-5-6 22:27 标题: 常用HE试剂配制

与丁老师商榷：我认为应在煮沸后，再加氧化汞，不会外溢，玻棒搅拌，煮沸时间根据需染色组织不同，可不同

作者: 风4657 时间: 2005-5-24 22:12 标题: 常用HE试剂配制

我看还是找别的试剂代替氧化贡的好1
那东西又有毒还易暴！用其他氧化剂要好点！

欢迎光临中华病理技术论坛 (http://bbs.zhbljs.com/bbs/)