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标题: 二甲苯浸泡肾组织泡了2h都不透明而且很黑很硬，求高人指点！ [打印本页]

作者: melody5_芥末 时间: 2012-3-31 08:49 标题: 二甲苯浸泡肾组织泡了2h都不透明而且很黑很硬，求高人指点！

本人在做肾组织的石蜡切片，肾组织是从-80℃里拿出来的，在4℃里放了会，然后10%福尔马林固定24小时。后面的梯度酒精脱水都很注意，每换一次酒精的时候都把瓶子吸干净了。

50%（1h）→70%过夜→80%（2h）→95%Ⅰ（90min）→95%Ⅱ（90min）→100%Ⅰ(1h)→100%Ⅱ(1h这里估计超过了20分钟)→二甲苯酒精（1:1 20min）→二甲苯Ⅰ（30min）→二甲苯Ⅱ（2h都还不透明）

我的步骤如上，二甲苯放了这么久都还不透明，组织又黑又硬，我估计两步有问题：冻存和无水酒精时间长了。。。

麻烦大家帮我分析下！！我现在主要是想找找补救的办法！谢谢！

作者: melody5_芥末 时间: 2012-3-31 09:06

另外，请教一下，软蜡可以过夜么？

作者: chinasunmoon 时间: 2012-4-10 07:28

这样的步骤做的肾切片，切时组织碎吗？我想切片时应该是不好切，组织应该碎。透明应该根据自己的经验。不知对否？

作者: chinasunmoon 时间: 2012-4-10 07:29

做肾组织切片，我们尽量不过夜。这样有时组织块硬不好切。

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