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标题: 中性缓冲福尔马林能用无水磷酸氢二钾、磷酸二氢钾配置吗？怎样配置？ [打印本页]
作者: cangzhoulizh    时间: 2012-5-9 11:57     标题: 中性缓冲福尔马林能用无水磷酸氢二钾、磷酸二氢钾配置吗？怎样配置？

中性缓冲福尔马林的配方大多是无水磷酸氢二钠、磷酸二氢钠，我们现在只有无水磷酸氢二钾和磷酸二氢钾，能用无水磷酸氢二钾、磷酸二氢钾配置吗？怎样配置？
作者: boleyn1986    时间: 2012-5-19 07:57

现在有好多试剂公司生产直接就可以稀释的缓冲液，你们直接买好的用就行了！
作者: 王华    时间: 2012-5-20 08:03     标题: 磷酸二氢钾、磷酸氢二钾配制的缓冲溶液不能代替PBS缓冲液用于病理实验

    理解缓冲溶液：
    缓冲溶液：能抵抗少量外来强酸、强碱而保持其pH值基本不变的溶液。
    缓冲溶液一般由具有足够浓度、适当比例的共轭酸碱对的两种物质组成，组成缓冲溶液共轭酸碱对的两种物质合称为缓冲系或缓冲对。
    磷酸二氢钠与磷酸氢二钠组成缓冲溶液，其缓冲对为：H2PO4-(弱酸) HPO42-(共轭碱)，
    质子转移平衡：H2PO-+H2OHPO42-+H3O+

    仅仅从化学原理来考虑，使用磷酸二氢钾与磷酸氢二钾也可以配制出pH值为7.2的缓冲溶液。
    但这种缓冲溶液不能替代PBS缓冲液使用在免疫组化及其他病理实验中，理由如下：
    人体血浆中Na+浓度为144mmol/L，K+浓度为5mmol/L，
        PBS溶液中的阳离子为Na+,用PBS缓冲液不仅仅考虑Ph值得稳定，还考虑了阳离子类型与浓度，尽量接近动物生理状态的内环境，使酶活性、抗体活性等等保持稳定。
    如果用磷酸二氢钾与磷酸氢二钾配制缓冲液，pH值可以满足7.2的要求，但K+浓度过高，会在一定程度上影响抗体的活性与反应的稳定性。我们做的免疫组化、原位杂交、FISH等等实验，归根结底都是“生物有机化学反应”，反应体系的离子类型、离子浓度一定会对反应的效果造成影响。


    以上仅为个人观点，希望能得到老师们的指正！
      

[ 本帖最后由 王华 于 2012-5-20 08:09 编辑 ]
作者: 王华    时间: 2012-5-20 10:42

更正一下：
质子转移平衡：H2PO4- + H2O  ←→ HPO42-  + H3O+
没法编辑上下标，没法打出双箭头，难为大家理解......
作者: 一个人的生活    时间: 2012-5-20 17:17

引用:
原帖由 王华 于 2012-5-20 08:03 发表
    理解缓冲溶液：
    缓冲溶液：能抵抗少量外来强酸、强碱而保持其pH值基本不变的溶液。
    缓冲溶液一般由具有足够浓度、适当比例的共轭酸碱对的两种物质组成，组成缓冲溶液共轭酸碱对的两种物质合称为缓冲系 ...
作者: cangzhoulizh    时间: 2012-5-21 15:31     标题: 谢谢

理解了
作者: KETTY    时间: 2012-10-17 23:51

买点PBS用蒸馏水稀释用吧 很便宜的。



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