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标题: 讨论一下：免疫组化组织修复的原理 [打印本页]

作者: 王华 时间: 2012-10-14 12:06 标题: 讨论一下：免疫组化组织修复的原理

病理科免疫组化制片，每天都会使用柠檬酸修复液，EDTA修复液，效果不同大家都知道，可为什么不同呢？

免疫组化组织修复的原理是什么？

为什么在免疫组化修复液中使用EDTA修复液的修复效果要强于柠檬酸修复液，为什么PH值越大的修复液修复效果越强？

作者: shanghainese 时间: 2012-10-15 07:15

大家有时间的时候,好好想一想。
建议大家看一看免疫学书籍和组织化学书籍。

作者: 天涯无风 时间: 2012-10-16 18:59

为什么呢，能讲点特别点的吗？

作者: 盼盼 时间: 2012-10-17 13:04

为什么？想听听老师们的讲解呀！

作者: q317476148 时间: 2012-10-17 14:10

有可能是PH的不同，使抗原电离出不同的离子，酸碱性不一样。和一抗结合率不一样。

作者: shanghainese 时间: 2012-10-19 14:18

大家要踊跃发言啊！
讲错，讲不全都没有关系。

作者: 陌路行客 时间: 2012-10-20 12:04

组织经过固定脱水浸蜡等一些列的处理，蛋白的抗原表位发生改变或被封闭，不能被抗体特异的识别，就需要修复以使其抗原表位暴露出来，至于不同的修复液和修复条件，可能就是根据不同蛋白的抗原表位的电离特性等原因吧，不知道说的准确不，请大家指正。

作者: shanghainese 时间: 2012-10-21 14:27

作者: 新手妈妈 时间: 2012-10-31 22:17

可能与抗原暴露原理不同及不同抗体对不同修复液的敏感性不一致有关。
微波、高温都可以暴露被掩盖的抗原决定簇。不同PH值的抗原修复液，可能由于裂解醛-氨基之间的交联或蛋白质之间的交联能力不同，抗原决定簇暴露程度不同，标记的效果也不同。酶可以溶解洗脱变性蛋白而达到抗原修复的作用。胰蛋白酶为中度消化酶，胃蛋白酶为强消化酶。

作者: 新手妈妈 时间: 2012-10-31 22:25

个人不是很同意楼主的观点，我觉得有些抗体柠檬酸修复要比EDTA好很多的。
而有些抗体就一定要用酶修复才能暴露抗原决定簇。

作者: shanghainese 时间: 2012-11-1 12:15

引用:

原帖由 新手妈妈 于 2012-10-31 22:17 发表
可能与抗原暴露原理不同及不同抗体对不同修复液的敏感性不一致有关。
微波、高温都可以暴露被掩盖的抗原决定簇。不同PH值的抗原修复液，可能由于裂解醛-氨基之间的交联或蛋白质之间的交联能力不同，抗原决定簇暴露程 ...

作者: shanghainese 时间: 2012-11-14 14:31

实际情况是非常复杂的。
抗原修复到目前为止还没有找到一个好的方法。现在较为普遍方法是用枸橼酸缓冲液和EDT做热修复。即使是这样绝大多数的单克隆抗体仍然无法使用在福尔马林固定的石蜡切片上。免疫组化受到了极大的障碍。

作者: 小惠子 时间: 2013-1-12 22:55 标题: 回复 1# 的帖子

高压修复，可使组织的醛基链打开，可使抗原暴露出来。

作者: shanghainese 时间: 2013-1-14 09:28

引用:

原帖由 小惠子 于 2013-1-12 22:55 发表
高压修复，可使组织的醛基链打开，可使抗原暴露出来。

但是抗原已经变性了。

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