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标题: 由经验主义而犯的错误--冰冻制片方法的探讨 [打印本页]

作者: dingwei    时间: 2002-12-2 21:47     标题: 由经验主义而犯的错误--冰冻制片方法的探讨

从我使用冰冻起,就对冰冻切片的质量非常重视,因为这是性命交关的事。当时我们使用的冰冻切片机是“光明”,和珊顿当时是同一厂家,没有速冻头。为了避免冰晶的产生,使细胞结构更清晰,我们经过反复试验,发现用液氮效果很好。后来买了MICROM的冰冻之星,说是世界上速冻最快的冰冻切片机,做出来的也是液氮的好,所以在多次会上我强调冰冻用要液氮,有人说用速冻头快速冷冻做出来的片子也很好,我不为然,自以为自己做的一定是对的。但是就是解决不了甲状腺细胞收缩的现象。
  半个月前,“德国知名品牌,拥有全球最新技术的病理产品--MICROM”的冰冻之星在一年里第二次不致冷,我们每天有20来个冰冻,这不是要我们的命,没办法,只要到省妇保去借了一台旧的冰冻切片机(莱卡的1850),听说这机器是老产品,做不出好片子,我们想总比没好。用了后发现,用此切片机的冷冻头做出来的片子,除脂肪外,片子比用液氮做的好,特别是甲状腺,细胞无收缩,无退变,冰晶少。十多年了的观点发生了改变。原因是没用过此类冷冻头,没有这方法的经验,就做出了结论,珊顿老的切片机,也没有冷冻头,一般组织要冻2-3分钟,而MICROM的冷冻头是一个圆形台,不能与组织直接接触,尽管说可达到零下40-45度,但冷冻组织还是要2分钟以上,用来压组织的冰冻头是控温,结果大量冰晶产生,细胞核不够清晰,而莱卡的冰冻头直接压在组织上,一般冷首当其冲只要30秒-50秒,而且,用液氮冷却,收缩快,容易脆,导致细胞收缩,而用冰冻头致冷,不会产生发脆的现象,所以 ,做出来的片子质量很好,当然含有脂肪的组织,如乳腺,大网膜等还是用液氮做的好。具体问题要具体分析,真所谓没有使用就没有发言权,我就是犯了经验主义的错误。连我们的老教授也说我们的观点要改了。  

作者: chenrong    时间: 2002-12-4 19:55     标题: 由经验主义而犯的错误--冰冻制片方法的探讨

引用:
下面引用由回头一笑^o^2002/12/03 11:11am 发表的内容:
看来丁老师的讲义又要升级了,大家注意查收。
丁老,您是不是考虑开个印刷厂.哈哈.... :em17:  :em17:
作者: frankbj    时间: 2002-12-9 20:07     标题: 由经验主义而犯的错误--冰冻制片方法的探讨

丁老师不错,善于总结
作者: fal    时间: 2002-12-16 23:06     标题: 由经验主义而犯的错误--冰冻制片方法的探讨

我们的Leica冰冻机比你的一台还差,还是12年前购入的1800型。虽坏过几次,但照样能切出厚薄均匀的冰冻切片。
目前仍在使用着,切5微米一点问题都没有。不过明年也许她要“退休”了。
Leica1800,您辛苦了!




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