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标题: 病理技术之33问-------Harris苏木素怎么配制？ [打印本页]

作者: 九日 时间: 2012-11-30 23:16 标题: 病理技术之33问-------Harris苏木素怎么配制？

虽说当下可以购买苏木素染色，但是知道苏木素是怎么配制出来的，对病理技术工作者来说很有必要。

1,称取苏木素2.5克溶解在25ml无水乙醇里。
2，另一烧杯中50克钾明矾溶解在500ml蒸馏水中，加热溶解。
3，以上两液加热混合。
4，加氧化汞1.25克，混匀。
5，溶液凉后加冰醋酸20ml.

过滤后就是Harris苏木素染液了。

作者: fangqingquan 时间: 2012-12-22 23:05

对不起，更正一下，应该是叫铝明矾，因为硫酸铝钾在这里的有效成份是铝而不是钾，铝明矾与苏木素的最佳比例比例应该是8~10：1。如果是否20：1配制后会形成凝胶样物，在效成份很少，染色力也很差。不信可以试试。

作者: dingwei 时间: 2012-12-27 08:05

硫酸铝钾应该叫钾明矾或白矾。这是个名称，和有效成份没有关系。

作者: shanghainese 时间: 2012-12-27 14:57

引用:

原帖由九日于 2012-11-30 23:16 发表
虽说当下可以购买苏木素染色，但是知道苏木素是怎么配制出来的，对病理技术工作者来说很有必要。

1,称取苏木素2.5克溶解在25ml无水乙醇里。
2，另一烧杯中50克钾明矾溶解在500ml蒸馏水中，加热溶解。
3，以上两 ...

氧化汞有两种，不知你用哪一种？

作者: fangqingquan 时间: 2012-12-27 16:20

谢谢丁老师！硫酸铝钾确实应该叫钾明矾或白矾。受益，赞！

作者: 梅花 时间: 2012-12-29 20:52

我是铝与苏木素的比例为20:1,我们的苏木素配好后仅用1周就不能用了,不管染多少片,就用1周,颜色由紫红到桔红色,不能用废弃,请问各位大侠何原因?我自己分析估计是自来水偏酸,带进染液的H离子越来越多,所以颜色变红了.

作者: fangqingquan 时间: 2012-12-29 21:46

引用:

原帖由梅花于 2012-12-29 20:52 发表
我是铝与苏木素的比例为20:1,我们的苏木素配好后仅用1周就不能用了,不管染多少片,就用1周,颜色由紫红到桔红色,不能用废弃,请问各位大侠何原因?我自己分析估计是自来水偏酸,带进染液的H离子越来越多,所以颜色变红了.

如果是配制Harris苏木素，硫酸铝钾与苏木素的比例一定不要超过10：1。
先用蒸馏水加热溶解硫酸铝钾，用无水乙醇溶解苏木素，把溶解的苏木素倒入已溶解的硫酸铝钾蒸馏水中，煮沸1~2分钟（不可过久！），慢慢加入红色氧化汞（苏木素与氧化汞比例2：1），继续加热和搅拌溶液至深紫色。随即（立即！）用冰水冷却，恢复至室温后过滤备用，使用前过滤后每100ml加冰醋酸4~5ml。
我们一直是这么配制，使用1~2个月都很稳定。你注意一下配制细节，应该能改善。

作者: 梅花 时间: 2012-12-29 22:39

感谢楼上老师。我几年来都是这样配的，方法与你一样，只是铝与苏木素的比例不一样，以前可以用一个月，而且使用过程中表面的氧化膜越来越多，分化后水冲5分钟可以蓝化，现在的要用氨水返蓝，否则细胞核无法蓝化，氧化膜也少，到最后变为桔红色，稀的。我问总务科说水源是有变的，用PH纸测是偏酸，苏木素变红，无法蓝化如何解释？

作者: 梅花 时间: 2012-12-29 22:54

再次请教一下，为什么铝与苏木素为10：1，很多技术书上Harris配方都是20：1，是不是改良了？

作者: xkj2797xkj 时间: 2012-12-29 23:30

硫酸铝钾作为媒染剂，主要是苏木红与二价铝盐结合，形成铝-苏木红蓝色色淀，与细胞核结合。如果所用硫酸铝钾量较多时，已经将近饱和，当温度降低和时间一长，就有结晶析出，所以，在配制苏木素时候硫酸铝钾量加多没有意义，实际还可将硫酸铝钾量稍减少。

作者: 九日 时间: 2013-1-1 00:15

发帖的最大意义就是提供同行们能够相互讨论共同提高的机会，经常做的工作经过讨论会更深入。向谈论者致敬

作者: fangqingquan 时间: 2013-1-1 20:41 标题: 回复9#

10#版主分析得很透彻。
我也从《实用病理组织染色技术》P39页学得：“从苏木素分子的结构来看，不可能结合很多的铝离子，溶液中过多的铝离子可使溶液呈胶体状并很快形成沉淀而失效。故作者认为1g苏木素用8.8g硫酸铝钾较宜，但究竟1g苏木素需多少铝还有待探讨。”
我们自己的经验也是铝与苏木素为10：1就足够了。
注意：氧化汞要慢慢加入！
有人建议半氧化法配制苏木素，就是加入较少量氧化汞。我们也试过，确定可维持较持久的染色力，你可以试试。
你们单位的自来水偏酸，那你只好用氨水配些pH值7~8的自来水作为反蓝液啦。

作者: 梅花 时间: 2013-1-3 21:43 标题: 标题

谢谢各位，我再按10：1来配看是否更好。

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