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标题: 片子切出来总是散啊，新手求指导 [打印本页]

作者: captain-jack 时间: 2013-4-9 15:33 标题: 片子切出来总是散啊，新手求指导

我主要做的是骨组织切片，EDTA脱钙2周，片子切出来总这样。本来要求切5mm，根本切不出来，完全散开；7mm这已经算好的了，但是染色出来发现镜下组织还是错位了。各位老师看看是不是因为组织处理哪一步没到位？我的组织处理流程：70%酒精2小时 80%酒精2小时 95%酒精1小时X2 无水酒精0.5小时X3 二甲苯1小时X2浸蜡：蜡缸1 30分钟 58度蜡缸2 过夜（我主要目的是观察中耳上皮及中耳腔渗液的情况，而中耳腔是一个密闭的腔，腊进不去，所以选择过夜，但还是发现腊进不去。。。有什么好办法吗？）

作者: histotechnology 时间: 2013-4-10 08:08 标题: 回复 1# 的帖子

无水酒精时间太短了

作者: captain-jack 时间: 2013-4-10 14:32

无水乙醇我用了3瓶，总共1个半小时，你们无水乙醇脱多久？

作者: histotechnology 时间: 2013-4-12 08:11 标题: 回复 3# 的帖子

还有是不是浸蜡时间太长了？

作者: ChenRong 时间: 2013-4-12 10:36

我记得好像你短消息过我，你的无水时间可以加长到1小时*3，二甲苯稍短些，蜡的时间过长不要过夜，组织细胞容易收缩，封闭的组织蜡时间再长也是进不去的，你就试试我前面说的灌注法或是不破坏结构的基础上切开，对于酒精和二甲苯其实也是这样

作者: captain-jack 时间: 2013-4-12 12:46

好，非常感谢！下批标本收集起来就照老师的方法做！

作者: jhyjhy2013 时间: 2013-7-4 16:24

不知EDTA脱钙后是否充分水洗？？因EDTA配制时需要pH至弱碱性才溶解，因此脱钙完毕应水洗充分。另，楼主说的散开是指切片时散开还是裱片时散开呢？切片时散开可能为组织透明过度，细胞过度收缩，组织发脆，切不成片，易散开；裱片时散开可能因组织中含脂质所致，或裱片水温太高。

作者: jhyjhy2013 时间: 2013-7-4 16:26

从楼主的图片上来看，切片还是成片了，只是有刀口，组织有点烂

作者: yangjiali 时间: 2013-7-4 16:37

有划痕，说明刀得换了，组织有点空洞可能是浸蜡不是很好

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