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标题: 脱水和透明 [打印本页]

作者: DINGWEI 时间: 2002-1-5 16:41 标题: 脱水和透明

所谓脱水就是利用脱水剂将组织内的水分置换出来，以利于有机溶剂的渗入，这一过程称为脱水。脱水是否彻底，直接关系到组织是否能充分透明，而脱水过度（原因是组织在纯酒精内时间过久，发生组织质地发生变化）容易造成组织发脆。造成组织发脆的原因还有加温（温度超过36℃）、脱水剂内加有丙酮、浸蜡用的石蜡中二甲苯过多等等。一般我们总认为组织发脆跟高浓度酒精有关，而忽视了与低浓度的酒精关系，其实低浓度的酒精具有强大的穿透力，比纯酒精更容易渗透到组织块内部使之脱水，组织如果在低浓度酒精里充分脱水，在高浓度酒精里只需脱去从低浓度到高浓度之间的水份，因此，仅需短时间就可完成，如果这时不缩短纯酒精的时间，便会引起组织发脆；如果脱水时加温，使用丙酮，还可引起组织收缩，并影响免疫组织化学的标记。为了使石蜡浸入到组织块内，必须经过一种既能与脱水剂混合，又能与石蜡相溶的媒介物质，这个过程称透明。目前最好的透明剂是二甲苯。很多人认为二甲苯极容易使组织发脆，这个观点很片面，在常温下，如果不是时间过长（超过２4小时以上）二甲苯并不会引起组织过份发脆，相反会使某些组织结构比较质韧的组织：比如子宫肌瘤等相当好切），但是当二甲苯温度超过40℃以后，极易引起组织发脆。所以本人认为，大小标本最好分开脱水，一般情况下，大标本脱水时间（室温18℃）以80％酒精2小时、95％酒精（2道）各1个小时至1个半小时、纯酒精（3道）各1个小时，二甲苯（2道）各20～30分钟为宜；小标本脱水时间应相应缩短。脱水时间长短，与室温高低有密切的相关。我们在实践中发现，室温在12～15℃时，可作为一个临界温度范围。当室温高于此温度范围时，组织容易脱水，可适当缩短脱水时间；而室温低于该温度范围时，应适当延长脱水时间（如能保证在一个恒定的温度下最佳）。更换试剂，应以量为基础，定量更换，不能等到切片不好时再去更换。否则，至少会有2～3批组织切片不好。根据我科经验，如试剂用量为500ml，每500个蜡块更换一次为宜。

作者: 朱峰 时间: 2010-2-26 11:00

学习！

作者: 一只苹果 时间: 2010-11-5 21:50

头脑长知识了........

作者: Toni2008 时间: 2010-12-2 15:56

学习了，

作者: xiaoniou777 时间: 2010-12-2 21:28

请问丁老师，如果大标本和小标本放到一起用全自动脱水机，用上述方法脱水小组织会发脆吗？

作者: dingwei 时间: 2010-12-3 09:10

大多数小标本与大标本一起脱水都不会发脆，只有极少数会发脆，而极那少数病例到底是本身分开脱水也会不会发脆，不清楚，因为我们在小标本脱水程序中也会发现极少数组织发脆，发脆的具体原因我们并没有完全搞清楚。

作者: xiaoniou777 时间: 2010-12-3 22:02

哦，看来得找找原因，可能跟固定什么的都有关吧，谢谢丁老师。

作者: idea 时间: 2010-12-8 12:53

学习了

作者: 老笨猫 时间: 2010-12-9 21:17

自动脱水机的温度设多少比较合适？

作者: 黄树叶 时间: 2010-12-10 14:56 标题: 回复 6# 的帖子

组织发不发脆本人觉得不能以脱水剂及其时间长短来衡量也应该考虑组织本身的性质（如甲状腺组织，它的粘液比较丰富，脱水干净之后就剩下粘液—胶质，那时候的胶质就像干涸的胶水一样是发硬、发脆的）当然，温度过高或者脱水过狠了组织也会固缩、发硬，就是我们经常在新换液体之后的第一次或第二次制片遇到的问题了。
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