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标题: 请教一下网染不上色的问题.. [打印本页]

作者: mitangshui 时间: 2014-5-1 12:29 标题: 请教一下网染不上色的问题..

我们的网染试剂一直都是自己配制的，之前一直都挺稳定的，步骤是0.5%高锰酸钾与0.5%的硫酸1:1混合滴染5分钟，蒸馏水洗，2%草酸1分钟，蒸馏水洗，2%硫酸铁铵，Gordon-Sweets银氨液滴染1分钟，蒸馏水洗，中性甲醛1分钟，蒸馏水洗，核固红染核。前段时间新配了高锰酸钾和硫酸铁铵之后就一直没有上色，基本是一点颜色都没有的那种。当时怀疑是高锰酸钾或者硫酸铁铵的问题，只是更换这两种试剂之后出现不上色，把这两种试剂又重新配也还是这样的结果。查了一下书，说不上色有可能是银氨液失效了，也换了新的氨水重新配了银氨液，但是结果还是没有颜色。鉴于这样的情况，实在想不到怎样解决这个问题了，请各位老师指导一下，谢谢！

作者: histotechnology 时间: 2014-5-1 16:26 标题: 回复 1# 的帖子

有没有可能银氨液没有配好

作者: mitangshui 时间: 2014-5-2 10:26

当时也考虑过是不是我配试剂有问题，后来就让另外同事重配几次，结果也是一样。当时考虑过是不是氨水失效，也重新订氨水回来重配。我们的配制方法参照《临床病理学技术》的。我其实比较偏向于高锰酸钾或者硫酸铁铵是不是有问题，毕竟是换了这两个试剂后出问题，只是科室的前辈说这两个试剂应该不可能过期，所以我就迷茫了。

作者: histotechnology 时间: 2014-5-2 11:50 标题: 回复 3# 的帖子

硫酸铁铵多长时间

作者: mitangshui 时间: 2014-5-2 21:43

已经有几年了吧，一直都用那个，其实想问一下这些化学试剂可以保存多久的呢？瓶子上面都没有写有效期，然后科室出于节俭原则，一般都要用完才能换。

作者: jensen0901 时间: 2014-5-3 00:45

看了几遍，方法是正确的，所有的都重新配过的，以前也出来，硫酸铁铵应该不会过期，我们网状纤维染色硫酸铁铵至少有10年以上，都好好的，你再看看试剂和配制方法，试剂特别是硝酸银纯度越高越好，甲醛也要注意，做特染关键是细节的地方，如果你找到问题所在，请发出来大家学习一下，好吧！

作者: xkj2797xkj 时间: 2014-5-4 20:04

将所配制的试剂放置一久再用。

作者: elma045 时间: 2014-5-26 23:32

组织固定及时吗？我们老师说，组织固定不好的话，网染是做不出来的呢~还有，您做了阳性对照了吗？甲醛是新鲜的吗？

作者: mitangshui 时间: 2014-7-28 22:26

后来发现了问题，是因为直接用了固定标本的甲醛，一直没有显色，后来重新单独配了中性甲醛就好了。但是科室的标本的固定液一直是说中性的，不知道为什么不行，后来参考书上说用碳酸钙中和的中性甲醛就显色了，不知道这个是什么原理呢？

作者: dingwei 时间: 2014-7-30 17:21

关键可能不在于是否中性，应该是甲醛的还原能力。就是用水配，显色也很好。所以新鲜配才是最重要的，用固定标本的甲醛是出问题的关键。

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