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标题: 求助，同一批片子同样是湿封，胃和宫内膜腺体不清楚！ [打印本页]

作者: sharse 时间: 2014-6-4 15:17 标题: 求助，同一批片子同样是湿封，胃和宫内膜腺体不清楚！

RT,胃组织和宫内膜腺体显色不清，其他如宫颈组织染色效果很好，上图，请各位老师帮忙指导下，谢谢了！[attach]7788[/attach][attach]7789[/attach][attach]7790[/attach][attach]7791[/attach][attach]7792[/attach][attach]7793[/attach][attach]7794[/attach][attach]7795[/attach][attach]7796[/attach][attach]7797[/attach]

作者: sharse 时间: 2014-6-4 15:20 标题: 求助，同一批片子同样是湿封，胃和宫内膜腺体不清楚！

RT，请各位老师帮忙找找原因，谢谢啦！后面三张是同一批片子里头的宫颈组织。

作者: 小谭 时间: 2014-6-4 23:37

发灰? 共染?

作者: histotechnology 时间: 2014-6-5 08:11 标题: 回复 2# 的帖子

求解

作者: dingwei 时间: 2014-6-5 17:05

组织固定、脱水时间不够是主要问题

作者: sharse 时间: 2014-6-6 08:22 标题: 回复 5# 的帖子

哦，谢谢，我们组织脱出来有些发硬，用的是环保型透明剂，具体时间
1.10%的甲醛：2:00h
2.AF液(100%j酒精：10%的固定液=1:9)：1:45h
3.80%的酒精：2:00h
4.95%j酒精：1:30h
5.95%j酒精：1:30h
6.100%酒精：1:00h
7.100%酒精：1:00h
8.透明剂（环保型）1:30h
9.透明剂（环保型）1:30h
10.蜡(1):1:30h
11.蜡（2:）：2:00h
12.蜡（3）：2:30h

作者: dingwei 时间: 2014-6-6 13:41

非常常见的问题，很多人不知道为什么要用AF液(100%j酒精：10%的固定液=1:9)，目的是什么？用了90%酒精浓度的AF液，为什么要从80%的酒精开始脱水？
用下面时间试一下：
1.10%的甲醛：3 h
2.80%的酒精：2:00h
3.95%j酒精：1:30h
495%j酒精：1:30h
5.100%酒精：2:00h
6.100%酒精：1:30h

作者: sharse 时间: 2014-6-6 14:48

谢谢，请问老师第二步是不是不要用AF液了？直接80%的酒精。

作者: sharse 时间: 2014-6-6 14:48 标题: 回复 7# 的帖子

谢谢，请问老师第二步是不是不要用AF液了？直接80%的酒精。

作者: dingwei 时间: 2014-6-6 16:59

不用AF液直接80%的酒精，试一下

作者: 497003163 时间: 2014-6-6 18:26

标本取来就要及时固定，脱水机里的酒精等要定期更换，我遇到过这个情况，结果是脱水机里面有些溶液不够了，换了就好了。

作者: sharse 时间: 2014-6-6 21:05 标题: 回复 11# 的帖子

谢谢，我再换下液体试下

作者: 郭建红 时间: 2014-6-23 10:09 标题: 回复 6# 的帖子

环保试剂就不好

作者: willfirm 时间: 2014-6-24 14:31 标题: 回复 1# 的帖子

丁伟老师说的对，组织处理有问题。
从这几张图片上可以发现线索：组织结构不完整，边缘破损，细胞间隙增大，可见较大裂隙。组织固定不佳，进而影响脱水。因为福尔马林的固定不佳，核内容物保存较差，会破裂进入细胞浆，胞浆内出现了的酸性的核酸物质会与苏木素结合，是细胞浆染上浅蓝色（相对于细胞核的深蓝），是为“共染”。前期的福尔马林固定效果不佳，会在酒精中得到补偿，然而，酒精对组织的皱缩明显，于是出现裂隙。另外，在您的标本固定较差的情况下，竟然没有出现明显的“核空泡”，猜想，更是因为酒精的脱水作用使组织发生严重的皱缩，镜下看，相对而言，反而觉得核更蓝了。
腺体部位的染色不清，直接原因是，脱蜡不足。如果不信，你可以让切片在环保透明中脱蜡过夜，第二天来染色。会明显减少这种现象。。。。说到根本上，还是前期处理标本环节有问题。。福尔马林固定时间短了影响脱水（检测一下你第一缸酒精浓度和净度，有没有溶解大量油脂？？？！！！），进而影响透明，最后影响浸蜡。

作者: sharse 时间: 2014-7-23 09:39

首先跟各位老师说声“对不起”，其实问题早已经解决了，只是没上来回复各位老师的留言。按丁伟老师给的意见把脱水时间调整了下，就好了！
这个程序是我们以前的，片子做出来效果不好
1.10%的甲醛：2:00h
2.AF液(100%j酒精：10%的固定液=1:9)：1:45h
3.80%的酒精：2:00h
4.95%j酒精：1:30h
5.95%j酒精：1:30h
6.100%酒精：1:00h
7.100%酒精：1:00h
8.透明剂（环保型）1:30h
9.透明剂（环保型）1:30h
10.蜡(1):1:30h
11.蜡（2:）：2:00h
12.蜡（3）：2:30h

按丁伟老师的意见调整的脱水程序：
1.10%的甲醛：3:00h
2.80%的酒精：1:30h
3.80%的酒精：2:00h
4.95%j酒精：1:00h
5.95%j酒精：1:30h
6.100%酒精：1:00h
7.100%酒精：1:30h
8.透明剂（环保型）1:30h
9.透明剂（环保型）1:30h
10.蜡(1):1:30h
11.蜡（2:）：1:30h
12.蜡（3）：2:30h
经过这个程序出来的片子染色效果挺好，没有再出现上面的情况。
由于现在没有在科室所以没法上传图片。

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