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标题: 求教各位同仁，切片染色的质量问题，在线等... [打印本页]

作者: 水映碧荷 时间: 2015-8-7 20:24 标题: 求教各位同仁，切片染色的质量问题，在线等...

最近切片染色后低倍镜视野下看到组织上粘附一些类似渣子的东西，高倍镜视野下是半透明的小颗粒，粘附在胞浆丰富的地方，这几天一直在找原因。做了如下实验：

1.苏木素的嫌疑已经排除，今天实验，冷配和热配的对照组用煮沸后的苏木素染色一样有半透明颗粒出现。

2.出现半透明颗粒的切片退回酒精浸泡一会儿，再重新透明后镜下看，暂且简称半粒吧，半粒消失。于是重新调了染色程序，

把脱水酒精梯度较高的几步都相应延长时间。结果不甚理想，依旧存在半粒。

3.脱水机脱水的酒精相应的延长了时间，结果不甚理想。
不知道还有哪里没有想周全，恳请各位同仁悉心指导。手机拍的，不是很清楚，镜下是半透明的颗粒状存在。

作者: 小小技术员 时间: 2015-8-7 22:09

你这是免疫组化的片吗？不像HE的哦，是不是你捞片的水不干净？或者你用的蒸馏水不干净？

作者: 水映碧荷 时间: 2015-8-7 22:24

就是he切片，红蓝染的不好，红蓝对比好的也一样有这半粒，蒸馏水和捞片的水是干净的啊

作者: 水映碧荷 时间: 2015-8-7 22:25 标题: 回复 2# 的帖子

就是he切片，红蓝染的不好，红蓝对比好的也一样有这半粒，蒸馏水和捞片的水是干净的啊

作者: 小小技术员 时间: 2015-8-7 22:40

建议你把摊片的酒精，捞片的水全换了，然后把伊红过滤下再试试，要不就重新配下伊红试试。染色时，分化后（进伊红前）水洗十分钟。

作者: 水映碧荷 时间: 2015-8-7 22:50 标题: 不好意思，再补一张上色好看点的

作者: 水映碧荷 时间: 2015-8-7 23:01 标题: 回复 5# 的帖子

恩恩，明天试试，谢谢啊

作者: blk8373 时间: 2015-8-10 15:17

从你说的第二条可以看出问题可能就出在脱水，透明，封片这三步，是不是封片前片子干了，出现的空气结晶？你自己好好再找找。也有可能是脱蜡没脱干净！

[ 本帖最后由 blk8373 于 2015-8-10 15:21 编辑 ]

作者: 水映碧荷 时间: 2015-8-17 20:58

好的，谢谢啦

作者: 水映碧荷 时间: 2015-8-17 20:59 标题: 谢谢啦

引用:

原帖由 blk8373 于 2015-8-10 15:17 发表
从你说的第二条可以看出问题可能就出在脱水，透明，封片这三步，是不是封片前片子干了，出现的空气结晶？你自己好好再找找。也有可能是脱蜡没脱干净！

作者: 小小技术员 时间: 2015-8-17 21:15 标题: 回复 10# 的帖子

你好，问题解决了吗？是楼上说的封片的问题么？你是说的那些褐色的一圈一圈的东西吗？我开始还以为你说的那些红色的点呢。。。。。

作者: lfxuejun 时间: 2016-1-10 21:48

问题应该是在透明环节，在适当延长脱水环节的基础上，更换新的透明剂试试。

作者: 小刚 时间: 2016-2-27 10:23

这个问题我也遇到了，提高拷片温度试一下，如果你问题已解决希望分享谢谢！

作者: 卢田 时间: 2017-6-8 15:36 标题: 回复 9# 的帖子

脱水不干净就入二甲苯了，建议你染色的时候，换2个无水酒精，在换下二甲苯透明封片

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