标题:
如何提高病理石蜡切片质量?
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作者:
无倦
时间:
2015-8-12 15:47
标题:
如何提高病理石蜡切片质量?
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病理荟
病理石蜡切片心得体会石蜡切片是组织学常规制片技术中最为广泛应用的方法。石蜡切片不仅用于观察正常细胞组织的形态结构,也是病理学和法医学等学科用以研究、观察及判断细胞组织的形态变化的主要方法,而且也已相当广泛地用于其他许多学科领域的研究中。我从事病理技术工作刚刚一年多,细细回味自己在实际工作中的切片过程,有一点点心得体会,在这里向大家做一简单汇报。一、组织脱水:要想切出一张好的石蜡切片,组织处理非常重要。经典的脱水方法,酒精脱水,二甲苯透明,石蜡浸蜡是最简单、方便、容易掌握,也是最便宜效果最好的方法。但脱水过程中尤其要注意的是梯度酒精脱水。在实际工作中,有时为了省事,往往采取倒掉第一缸酒精,后面往前移,这样会导致第一缸酒精浓度偏高,高浓度酒精,能使蛋白质凝固,使组织表面发硬,酒精无法渗透到组织深处,造成组织脱水效果不佳,从而不能切出优质石蜡切片。我的做法是,在更换液体时,尽管是后边液体往前边倒,但一定要测量其浓度,不合适就要调整到合适为止。这样像子宫平滑肌瘤这样的硬组织也能切除很好的切片。二、组织包埋:组织包埋好坏同样会影响石蜡切片质量。有些小组织,特别是内窥镜活检组织,如果组织没切全,就有可能会影响诊断。因此。小组织切出优质切片的重要步骤是把好组织包埋这一关。首先,最好选用5x5mm或更小的包埋底模,这样的底模即可将组织完全置于蜡块切面的中心,又可连续切片并将蜡片捞在载拨片相对集中的区域而利于阅片诊断。另外,包埋时先把底模放入少许石蜡,将组织移放在底模里移至冰上,待石蜡略冷却再用齿科镊子将组织集中到一块并按压到一个平面后,再注满石蜡,平移到冰台上。三、组织切片:切片工艺上稍加讲究,就可做到“多”、“快”、“好”、“省”。1、先粗切所有蜡块。用废弃刀片将每个蜡块粗切至组织全部暴露的最大切面,边切边排序,摆放在事先做好的冰盘中冷冻。2、全部蜡块粗切完成后,再更换新刀片细切。将冰冻好的蜡块迅速按放固定好,先切2-3张,削去浮蜡后即可连续切片,切片时要求用力均匀柔和,摇速不宜过快或者过慢,切片厚度一般为3-5um,如为淋巴结,切片厚度应为3um,这样镜下细胞无重叠,清晰,透亮利于诊断。切出的蜡片先放在入40℃热水中,在这种温度下,蜡片迅速舒展得非常平整,再裱贴至载玻片上。采用这种方法切片,既有速度又节省刀片,最主要的是能切出高质量的切片。四、染色:染色同样会影响切片的整体质量。染色过程中最重要的是苏木素染色后经盐酸酒精分化,流水冲洗即反蓝过程,时间一定要充分,否则切片再好,镜下结构也不够清晰。切片经过染色后,通过各级酒精脱水,由低浓度到高浓度,低浓度酒精对伊红有分化作用,时间要短,向高浓度时逐步延长脱水时间,染色经过脱水后必须经过二甲苯处理,这样的切片看切来才晶莹剔透,使阅片者赏心悦目。以上是我在工作中得出的一点体会,不足之处请各位批评指正。
作者:
张丽华
时间:
2015-12-11 14:10
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