标题:
各位老师，刚开始做切片，发现很多问题但是不知道原因，请老师指点一下
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作者:
晨沫
时间:
2016-3-20 20:12
标题:
各位老师，刚开始做切片，发现很多问题但是不知道原因，请老师指点一下
1、组织细胞断裂[attach]8086[/attach]2、组织不在同一平面[attach]8087[/attach]
3、染色对比不明显[attach]8088[/attach]
作者:
zyc921115
时间:
2016-3-20 21:44
一步一步，从脱水切片染色，全部按照规范来，是不会有问题的
作者:
晨沫
时间:
2016-3-20 22:43
因为我是按照我之前的同事留给的操作方法做的和规范是有区别的，有的地方没有条件按照标准操作。
脱水：75%酒精过夜，85%酒精1.5h（9点换第二道酒精），95%酒精1h，95%酒精1h，无水乙醇1h，无水乙醇1h;
透明：三道二甲苯各20分钟（试剂是刚换的）
浸蜡：恒温箱一道石蜡57度过夜（4点到8点30）：
包埋：恒温箱温度升到65度，包埋机包埋（温度：62度）
。。。。。
拷片：57度恒温箱过夜
脱蜡：2道二甲苯各15分钟，梯度酒精每道5下
染色：苏木素5分钟（新换的试剂），分化液（新换的试剂）5下，流水兰化30分钟，伊红（试剂未换）1分钟
作者:
dingwei
时间:
2016-3-21 07:58
感觉和组织处理关系不大，可能是切片技术和染色的问题
作者:
zyc921115
时间:
2016-3-21 21:51
标题:
回复 3# 的帖子
手工脱水？前段时间，我们脱水机坏了也是手工的，处理后的标本和机器的差距还是很大的。另外你的蓝化30分钟也太吓人了吧，不过看你的过程应该问题不大，时间都够了，切片有皱。
作者:
晨沫
时间:
2016-3-23 11:36
这个案子之后发现蜡块凹陷，我想是脱水和一道石蜡浸蜡二甲苯含量比较高，所以就换了脱水时间和浸蜡的蜡，但是发现还是有问题的。福尔马林固定的组织，流水冲洗1晚
脱水：75% 2h
85% 2h
95% 2h
95% 1h
100% 1h
100% 1h
但是，放入二甲苯中30分钟透明还是不明显，所以又返回无水乙醇中有脱水1h，透明效果还是不理想。
作者:
dingwei
时间:
2016-3-24 07:31
1、固定多少时间？
2、水冲洗1晚太长了，20分钟就可以。
3、脱水：75% 2h
85% 2h
95% 2h
95% 2h
100% 2h
100% 2h
二甲苯 45分钟
二甲苯 45分钟
作者:
晨沫
时间:
2016-3-25 09:45
不好意思，没有说清楚，我不是做活检的，我是做法医病理的，组织都是福尔马林固定1周左右的，因为是手工脱水的，为了方便，所以我一般都是流水冲洗4个小时或一夜的。
作者:
晨沫
时间:
2016-3-25 09:52
为了方便我们浸蜡就用一道蜡，57度过夜，第二天上班再升温65度包埋，我们用的蜡是58-60的蜡。
作者:
dingwei
时间:
2016-3-28 10:33
增加脱水时间，减少冲洗时间.
作者:
晨沫
时间:
2016-3-30 20:12
丁老师，还得麻烦您帮忙看一下。我在做另一个案子的时候，调整了脱水与冲水的时间。发现除了个别脑没有脱水脱好，其他组织脱水都可以的，但是老师观片的时候还是出现了心肌和肺组织细胞大部分都是碎裂的情况，但是脑组织、肾组织等都是可以的。
冲水：2点—5点半
75%：过夜
85%：9点—11点
95%：11点—13点
95%：13点—15点
100%：15点—16点半
100%：16点半—18点半
两道二甲苯：90分钟
第一道蜡：恒温箱59度 30分钟（已经更换了石蜡）
第二道蜡：包埋机中60度，2小时（2小时候包埋机自动关机）
第二天9点20包埋机65度自动开机，下午1点半开始组织包埋的
组织摊片的时候只能在40度或39度中摊片，42度就石蜡就开始化了。
作者:
histotechnology
时间:
2016-3-31 16:27
标题:
回复 1# 的帖子
这都是什么东西,看不清楚.
作者:
雄黄酒
时间:
2016-4-4 18:45
你石蜡的熔点是多少啊，42度就化了？你的意思是蜡块都是在包埋机里过夜，第二天下午才包埋？
作者:
艺YY
时间:
2016-6-22 23:44
你是不是用软蜡。。。或者蜡的品质不好，我以前也收到别的医院蜡块，切完放45度热水，就涨很开，手麻脚乱的赶快捞。
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