中华病理技术论坛 - Powered by Discuz! Board

标题: 组织发白问题请教解决之道 [打印本页]

作者: 布鲁克66 时间: 2016-7-6 11:07 标题: 组织发白问题请教解决之道

组织发白问题请教解决之道组织发白问题请教解决之道常规切片问题请教老师，请各位老师不吝赐教我们科室是贵州南部的一家医院，限最近切片质量问题特别多我把我们工作过程发上来请各位老师帮忙找找原因1、孝感国产的生物组织自动脱水机甲醛：10% 3小时第 1缸参考附近三甲医院甲醛：10% 2小时第2缸参考附近三甲医院空缸 0小时第3缸 95% 酒精 1小时第4缸 95%酒精 1小时第5缸 95%%酒精 1小时第6缸 95%酒精 1小时第7缸无水乙醇 1小时第8 缸二甲苯 40分钟第9缸石蜡I 30分钟第10缸石蜡II 1小时第11缸石蜡III 1.5小时第12缸以上；脱水、透明、浸蜡均参考于《临床技术操作规范病理分册》，根据自己经验设置，脱水机用了13年，方法一直都是以上的方法，没有改变过，大小标本从来没有出现问题。一年前出现蜡缸温度会自动升高到78°后不会再降到设置的60°，后厂家维修好后，测试了温度正常，用了近一年，测试蜡缸温度正常，大小标本都好，没有任何问题。最近这个月以来（2016-6）胃镜等小标本总是出现发白现象，但是小标本不是每例都发白，有2-3例发白，大的标本没问题，我们测试了温度也是设置的温度60°，请各位老师帮忙分析原因，谢谢说明：三道石蜡均是硬蜡蜡缸温度设置58℃2、包埋蜡也是硬蜡蜡温60℃ 缸温62℃ 台面65℃ 包埋好后放到冰箱里冷冻3、出现的问题小组织如镜检的组织切片时能连成带，所用的脱水方法和染色方法在2014年之前所有的标本从未出现发白问题，2015年4月份也出现过小标本发白问题，当时测试蜡缸温度是78°，我科设置温度是60°，温度计量了就是78°，。现在最近这个月以来（2016-6）胃镜等小标本总是出现发白现象，大的标本没问题，温度计量了温度正常，60°，更换所有的试剂，固定剂、脱水剂、二甲苯、石蜡，全部更换，第二天小标本稍微好点，但是第三天标本有回到以前的发白状态，请各位老师帮忙分析原因，谢谢非常头疼的问题，更换脱水剂，固定剂、二甲苯、石蜡，频率比以前都还块，就是小标本处问题，大标本梅问题。这些问题请各位老师帮我看看错误的地方我提早改正，谢谢上传的小标本染色照片，大家帮忙看看有什么解决办法。

作者: 布鲁克66 时间: 2016-7-6 11:19

附脱水程序：第一缸.：1%0甲醛： 3小时
                     第二缸：10% 甲醛： 2小时
                     第三缸  ：空缸       0小时
                     第四缸.：  95% 酒精    1小时
                     第五缸： 95%酒精    1小时
                     第六缸. ： 95%酒精    1小时
                     第七缸. ： 95%酒精    1小时
                     第八缸：    无水乙醇    1小时
                     第九缸：二甲苯    40分钟
                     第十缸：石蜡I          30分钟
                     第十一缸：石蜡II       1小时第
                  第十二缸    ：石蜡III       1.5小时

作者: 布鲁克66 时间: 2016-7-6 11:21

根据自己经验设置，脱水机用了13年，方法一直都是以上的方法，没有改变过，大小标本从来没有出现问题。一年前出现蜡缸温度会自动升高到78°后不会再降到设置的60°，后厂家维修好后，测试了温度正常，用了近一年，测试蜡缸温度正常，大小标本都好，没有任何问题。最近这个月以来（2016-6）胃镜等小标本总是出现发白现象，但是小标本不是每例都发白，有2-3例发白，大的标本没问题，我们测试了温度也是设置的温度60°，请各位老师帮忙分析原因，谢谢说明：三道石蜡均是硬蜡蜡缸温度设置58℃2、包埋蜡也是硬蜡蜡温60℃ 缸温62℃ 台面65℃ 包埋好后放到冰箱里冷冻3、出现的问题小组织如镜检的组织切片时能连成带，所用的脱水方法和染色方法在2014年之前所有的标本从未出现发白问题，2015年4月份也出现过小标本发白问题，当时测试蜡缸温度是78°，我科设置温度是60°，温度计量了就是78°，。现在最近这个月以来（2016-6）胃镜等小标本总是出现发白现象，大的标本没问题，温度计量了温度正常，60°，更换所有的试剂，固定剂、脱水剂、二甲苯、石蜡，全部更换，第二天小标本稍微好点，但是第三天标本有回到以前的发白状态，请各位老师帮忙分析原因，谢谢非常头疼的问题，更换脱水剂，固定剂、二甲苯、石蜡，频率比以前都还块，就是小标本处问题，大标本没问题，大家帮忙看看有什么解决办法

作者: dingwei 时间: 2016-7-6 13:35

烤片温度是多少？烤多少时间？烤片延长一个小时试一下。

作者: 布鲁克66 时间: 2016-7-6 14:44 标题: 回复 4# 的帖子

烤片温度70°，30分钟

作者: 布鲁克66 时间: 2016-7-6 14:46

附脱水程序：第一缸.：10%甲醛： 3小时
                     第二缸：10% 甲醛： 2小时
                     第三缸  ：空缸       0小时
                     第四缸.：  95% 酒精    1小时
                     第五缸： 95%酒精    1小时
                     第六缸. ： 95%酒精    1小时
                     第七缸. ： 95%酒精    1小时
                     第八缸：    无水乙醇    1小时
                     第九缸：二甲苯    40分钟
                     第十缸：石蜡I          30分钟
                     第十一缸：石蜡II       1小时第
                  第十二缸    ：石蜡III       1.5小时

作者: 小晓 时间: 2016-7-7 19:02 标题: 组织发白

我们这最近几个月也有组织发白的情况，最初包埋切片很正常，等到标本切完封蜡的时候就出现组织发白凸起。从固定到试剂更换，能想的办法都试过，还是没能解决。主要是内镜小标本，大标本还好

作者: 小晓 时间: 2016-7-7 19:17 标题: 组织发白

不过我们的HE切片、染色倒还好，只是影响第二次组化切片。
我看上面发白的HE染色的切片，会不会是因为第一次活检后固定液的原因？

作者: bonniewen 时间: 2016-7-7 21:16

老师，不知道是不是跟您们没有设置梯度脱水有关系？梯度酒精脱水一方面不易使组织变脆；二是可不断取代组织中的水分，直至彻底脱净，才能保证让蜡彻底进入组织内。如果组织脱水不彻底，包埋出来的蜡块会发软、发白、切片厚薄不均，易出现灰染甚至拒染。以前我们也用过孝感亚光的脱水机，开放式的，设置的程序如下：4%中性甲醛、75%酒精、85%酒精、95%酒精、95%酒精、100%酒精、100%酒精、二甲苯Ⅰ、二甲苯Ⅱ、石蜡Ⅰ、石蜡Ⅱ、石蜡Ⅲ。

作者: 小豆芽 时间: 2016-7-16 18:23

或许首要的固定这一步，你们就没有严格把关。胃镜标本，不是说送到病理科及时固定（中性福尔马林液）就够了，而是标本离开人体，在胃镜室就该及时固定。

作者: 西米 时间: 2016-8-12 18:12

以前我也出现这个情况，后来更换固定液及透明剂就好了

作者: dingwei 时间: 2016-8-20 19:26

引用:

原帖由 布鲁克66 于 2016-7-6 11:07 发表
组织发白问题请教解决之道组织发白问题请教解决之道常规切片问题请教老师，请各位老师不吝赐教我们科室是贵州南部的一家医院，限最近切片质量问题特别多我把我们工作过程发上来请各位老师帮忙找找原因1、孝感国产 ...

延长烤片时间一小时试一下

作者: 菜鸟上路 时间: 2016-8-27 07:47

我们也出现过这种问题，后来换了二甲苯就好了。。感觉现在的二甲苯质量太差，时效太短

作者: dingwei 时间: 2016-9-7 09:58

大标本没有问题，小标本有问题，肯定不会是二甲苯有问题。
小标本烤片时，水会盖在组织上；而大标本烤片时，水会流向组织外围。因此，要把小标本组织表面的水烤干，否则二甲苯与水不相溶，导致脱蜡不干净。

欢迎光临中华病理技术论坛 (http://bbs.zhbljs.com/bbs/)