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标题: 基底膜、中性粘液、糖原染色法 (P.A.S.) [打印本页]

作者: dingwei 时间: 2002-1-18 22:18 标题: 基底膜、中性粘液、糖原染色法 (P.A.S.)

[这个贴子最后由dingwei在 2003/10/20 09:40pm 编辑]

      基底膜、中性粘液、糖原  (P.A.S.)法
碱性品红 1 g 活性炭 2 g
当量盐酸 20 ml 偏重亚硫酸钠 1.5 g
Schiff试剂配制:
1. 碱性品红1g，放入200毫升蒸馏水中，煮沸，搅拌，充分溶解。
2. 冷却至50℃时过滤，滤液中加入当量盐酸20毫升。
3. 加偏重亚硫酸钠 1.5 g，置于暗处过夜。
4. 加活性2 g，摇晃，过滤，以无色为****。棕色瓶，4℃冰箱保
存。
染色步骤:
1. 切片脱蜡至蒸馏水。
2. 1%过碘酸水溶液5～10分钟。
3. 蒸馏水洗多次。
4. Schiff液10～15分钟。
5. 流水冲洗10分钟。
6. 苏木素复染。（1～2分钟）
7. 酒精脱水，二甲苯透明，树胶封固。
结果：基底膜、中性粘液、糖原红色。
注意：1.做糖原染色阴性对照片用淀粉酶消化处理。
   2.糖原染色容易水解，取材标本最好新鲜，不要经过水洗，最好用苦味酸酒精固定。
   3.固定液用中性福尔马林为佳。
   4.如Schiff液发红, 再加入少量偏重亚硫酸钠,使液体颜
   色变清后又可使用.

作者: 楷 时间: 2003-3-9 12:06 标题: 基底膜、中性粘液、糖原染色法 (P.A.S.)

请教丁老师:1%的高碘酸水溶液配法:高碘酸1克,双蒸水99毫升.是否正确.
   1%的高碘酸酒精2溶液:高碘酸0.4克,1/5克分子醋酸钠 5毫升, 95%酒精 35毫升,
   双蒸水10毫升.是否正确.
   PAS染色用高碘酸的水溶液好还是酒精溶液好呢?

作者: dingwei 时间: 2003-4-4 17:22 标题: 基底膜、中性粘液、糖原染色法 (P.A.S.)

没试过，你可以把二种方法对比一下。1%的高碘酸水溶液配法应该没错。

作者: 戴妮丝 时间: 2003-8-24 12:12 标题: 基底膜、中性粘液、糖原染色法 (P.A.S.)

丁老师：苏木素复染得目的试什么呢？如果单是多糖是否可以不用苏木素复染！

作者: 〖非我莫属〗 时间: 2003-9-13 15:22 标题: 基底膜、中性粘液、糖原染色法 (P.A.S.)

苏木素在这里是衬染的作用,让细胞核些许着色,这样使PAS阳性结果更容易判断!

作者: 楷 时间: 2003-9-26 11:02 标题: 基底膜、中性粘液、糖原染色法 (P.A.S.)

丁老师：我在染片时Schiff液暴露在空气中十分钟后就变红，是否有问题？染出的片特红。染液该如何改进？

作者: bing564 时间: 2003-9-28 18:03 标题: 基底膜、中性粘液、糖原染色法 (P.A.S.)

此图很漂亮啊，不愧为浙一技术一把手

作者: dingwei 时间: 2003-9-28 20:56 标题: 基底膜、中性粘液、糖原染色法 (P.A.S.)

引用:

下面引用由楷在 2003/09/26 11:02am 发表的内容：
丁老师：我在染片时Schiff液暴露在空气中十分钟后就变红，是否有问题？染出的片特红。染液该如何改进？

可以是偏重亚硫酸钠不纯了，可多加一点试一下。

作者: 楷 时间: 2003-10-20 15:16 标题: 基底膜、中性粘液、糖原染色法 (P.A.S.)

丁老师：我往100ML SCHIFF 液中加入1克偏重亚硫酸钠，结果还是一样，染片过程中大约十分钟后染液就变红。

作者: dingwei 时间: 2003-10-20 21:35 标题: 基底膜、中性粘液、糖原染色法 (P.A.S.)

你的偏重亚硫酸钠可能已经失效了。买新的了。

作者: 朱丽叶007 时间: 2012-2-12 22:11 标题: 回复 1# 的帖子

学习

作者: 新手妈妈 时间: 2012-3-2 23:33

请教丁老师，偏重亚硫酸钠怎样保存，我们买的都是500g装的一大瓶，但用几年了也就用那么一点，剩下的应该怎么保存比较好？我们现在是密封了室温保存的，能用多少年啊？

作者: hx362788806 时间: 2012-3-10 14:48

引用:

原帖由楷于 2003-9-26 11:02 发表
丁老师：我在染片时Schiff液暴露在空气中十分钟后就变红，是否有问题？染出的片特红。染液该如何改进？

你的片子是用蒸馏水洗的吗？估计你是用自来睡洗的吧！
其实变红也没事，就是提前显色而已

作者: 虾米DE美好生活 时间: 2012-3-14 13:00

我用的偏重亚硫酸钠都是90年代的那种大玻璃瓶的~~~~

作者: 悠悠我心 时间: 2012-3-21 22:03

请问丁老师，怀疑糖原累积症的肝穿标本用95%酒精固定后，是否直接95%酒精、无水酒精二甲苯、再浸蜡包埋

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