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标题: [求助]熟悉神经组织的朋友请进,看看我染出来的是什么? [打印本页]

作者: 精灵之音    时间: 2006-4-10 13:11     标题: [求助]熟悉神经组织的朋友请进,看看我染出来的是什么?

我做的是小鼠海马石蜡切片的免疫组化,照片中的组织在海马区附近。
本应该是神经元细胞胞浆阳性,可是好像神经元都是阴性的,反倒是很多小树枝样的东西很清楚。请问这些是神经细胞还是血管?有办法除掉这种非特异性的东西吗?
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作者: 精灵之音    时间: 2006-4-10 13:20     标题: [求助]熟悉神经组织的朋友请进,看看我染出来的是什么?


作者: shanghainese    时间: 2006-4-10 13:37     标题: [求助]熟悉神经组织的朋友请进,看看我染出来的是什么?

图片太小,分辨率太低看不清楚.
作者: 精灵之音    时间: 2006-4-10 17:58     标题: [求助]熟悉神经组织的朋友请进,看看我染出来的是什么?

发两张放大的看看
作者: 精灵之音    时间: 2006-4-10 18:00     标题: [求助]熟悉神经组织的朋友请进,看看我染出来的是什么?


作者: shanghainese    时间: 2006-4-10 23:18     标题: [求助]熟悉神经组织的朋友请进,看看我染出来的是什么?

是血管。
可能灌注固定时,血液没有冲洗干净。
没有见到神经原和胶质细胞有阳性染色。
作者: 精灵之音    时间: 2006-4-11 10:31     标题: [求助]熟悉神经组织的朋友请进,看看我染出来的是什么?

多谢斑竹!
那请问有办法除掉这种非特异性吗?满片子都是,干扰我看结果。

作者: fangdang    时间: 2006-4-11 12:19     标题: [求助]熟悉神经组织的朋友请进,看看我染出来的是什么?

要看你所用的抗体是否为特异性地标记血管内皮,如果是地话就无法消除。
作者: shanghainese    时间: 2006-4-11 13:29     标题: [求助]熟悉神经组织的朋友请进,看看我染出来的是什么?

引用:
下面引用由精灵之音2006/4/11 09:31am 发表的内容:
多谢斑竹!
那请问有办法除掉这种非特异性吗?满片子都是,干扰我看结果。
您用的一抗是不是与血小板有反应?

作者: 精灵之音    时间: 2006-4-11 15:40     标题: [求助]熟悉神经组织的朋友请进,看看我染出来的是什么?

我的一抗是抗淀粉样蛋白的,几乎所有染出的鼠脑片上都有这种小血管出现,但在人脑组织上同样做,就没有见到这种情况。
不过不知道是不是因为我用鼠源的一抗做鼠脑引起的。
在片子上还能看到些成簇的红细胞团,也是阳性着色,用了两种抗体,在鼠脑片子上都是这样的。
据说红细胞和血管内源酶丰富,我用3%H2O2作用10min也除不掉吗?
作者: shanghainese    时间: 2006-4-11 23:27     标题: [求助]熟悉神经组织的朋友请进,看看我染出来的是什么?

引用:
下面引用由精灵之音2006/4/11 02:40pm 发表的内容:
我的一抗是抗淀粉样蛋白的,几乎所有染出的鼠脑片上都有这种小血管出现,但在人脑组织上同样做,就没有见到这种情况。
不过不知道是不是因为我用鼠源的一抗做鼠脑引起的。
在片子上还能看到些成簇的红细胞团,也 ...
您的一抗是不是小鼠抗人抗淀粉样蛋白?如果是。而您用的二抗又是抗小鼠的。
您这样做在人脑组织或人的其它组织上没有问题。
但是,您用同样的方法在小鼠脑组织或小鼠其它组织上就有问题。先不说您的一抗与小鼠有无交叉反应;您的二抗就会与小鼠自身的免疫球蛋白起反应而产生法特异性染色。
您应该看看人脑组织上的染色是否正确?再看看小鼠脑组织的阴性对照怎样?
作者: 精灵之音    时间: 2006-4-12 11:06     标题: [求助]熟悉神经组织的朋友请进,看看我染出来的是什么?

原来是这样啊,明白了。
人脑组织染色结果是正确的,小鼠阴性对照也有和上面照片一样的血管着色,看来是抗体的问题,一抗只有鼠的,凑活看了,呵呵。
多谢shanghainese 斑竹!
作者: shanghainese    时间: 2006-4-12 13:14     标题: [求助]熟悉神经组织的朋友请进,看看我染出来的是什么?

引用:
下面引用由精灵之音2006/4/12 10:06am 发表的内容:
原来是这样啊,明白了。
人脑组织染色结果是正确的,小鼠阴性对照也有和上面照片一样的血管着色,看来是抗体的问题,一抗只有鼠的,凑活看了,呵呵。
多谢shanghainese 斑竹!
你染出来的是小鼠脑组织里的免疫球蛋白,这切片没有意义和价值.





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