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标题: 求助原位杂交 [打印本页]

作者: 4℃ 时间: 2003-11-17 19:10 标题: 求助原位杂交

各位老师，我想问一下原位杂交一些比较基本的问题：
1 固定多长时间比较合适？
2 用寡核苷酸探针检测神经组织mRNA很容易出现核着色,我想有没什么特殊的处理方法？

作者: sjjxjl 时间: 2003-11-23 13:57 标题: 求助原位杂交

石蜡切片和免疫组化差不多固定，最好4度，冰冻切片我以前做是组织取后冻液氮中，切片后放-70冰箱做时用4%PFA固定1小时
做mRNA ISH 最好用cRNA探针

作者: 4℃ 时间: 2003-11-23 20:38 标题: 求助原位杂交

太感谢了，因为我看有些资料做ISH冰冻切片,切片后%4 PFA固定10~30min,我以前一直按这个方法做，结果背景比较高，回头试试固定1h。

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