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标题: 非特异性着色的原因 [打印本页]

作者: DINGWEI 时间: 2002-1-12 22:38 标题: 非特异性着色的原因

1．抗体稀释度过高，导致切片深染。
   现象：分不清是那些细胞着色。
   解决方法：找出最佳的稀释比。
2．抗体不纯，或抗体特异性不强，交叉反应较多，或抗体表达
   较弱。如现在新出的很多癌基因，大多有这类情况。
   现象：阳性细胞和阴性细胞都着色，只是阳性细胞着色略强
   一些。像这类情况很难有好的办法解决，可找一个背景着色
   较浅的试剂盒试一下，或用胰酶消化，或用微波修复。
  3．抗体本身的特异性异常表达。从理论上说一种抗体只能与其相
   应的抗原起免疫反应，但经过长时间实验以后，发现很多组织
   都有“例外”的表达，目前大多用细胞的分化不同阶段其抗原
   性有相应的变更来解释，可能还有很多我们目前不知的原因。
   这种情况我们就没办法解决了。
  4．抗体孵育时间过长，或孵育温度过高，导致着色过深。不能
   补救。

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