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标题: 请教有关一抗的问题? [打印本页]

作者: stone    时间: 2003-5-13 10:02     标题: 请教有关一抗的问题?

请教各位老师,一抗用是用什么稀释的 啊?我 查文献有的用PBS,有的用山羊血清(或小牛血清)、PBS、Triton-X 100稀释的,请问二者有区别吗?
  我用的一抗是P-P38,要求在-20度保存,如果我拿出来在常温下稀释会不会对结果有影响?如果反复放进-20度冰箱是不是也会破坏抗体?
  希望高手指教,谢谢!

作者: 临风揽月    时间: 2003-5-13 16:58     标题: 请教有关一抗的问题?

常规我们是把试剂分装后放在-20度保存,用时取出一管,用抗体稀释液稀释后可用一段时间,4度保存。反复冻溶会使抗体的效价降低!
最好是用抗体稀释液稀释抗体,它可以保存抗体三个月至半年左右,4度冰箱保存,比较方便!
作者: dingwei    时间: 2003-5-16 17:11     标题: 请教有关一抗的问题?

我们不分装,原液就放在4度冰箱保存,我有89年进的一抗原液,一部份冰冻,一部份4度冰箱保存。最现在4度冰箱保存的效果也很好,效价比冷冻的要好(我怀疑有可能是低温冰箱有时停电导致反复冻溶的影响。)
作者: zhtp2003    时间: 2003-5-19 10:52     标题: 请教有关一抗的问题?

现在稀释抗体一般用PBS比较少,一般用正常小牛血清+PBS+Triton-X 100(增进细胞膜的通透性)+叠氮钠。这个配方国外都用这个。我在日本用这个,他们是在美国学的。
作者: stone    时间: 2003-6-1 22:29     标题: 请教有关一抗的问题?

   谢谢各位老师执教!
   还有个问题想请教各位老师,我买的一抗是国外的,二抗是国内的,二者提供的产品说明书的试验条件都不一样。例如抗体和切片的孵育时间;缓冲液洗的时间;还有缓冲液用的都不一样,国外的用TBS,国内的用PBS,两种缓冲液效果有区别吗?我该遵照哪个试验条件呢?
作者: 临风揽月    时间: 2003-6-5 15:25     标题: 请教有关一抗的问题?

pbs或tbs随便用!就按常规操作就可以!
作者: 高山流云    时间: 2003-7-24 18:41     标题: 请教有关一抗的问题?

楼上的老师说稀释一抗用正常小牛血清+PBS+Triton-X 100+叠氮钠。能告诉我您的的配方和浓度吗?谢谢!




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