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标题: 免疫组化用冰冻切片好还是石蜡切片好？ [打印本页]

作者: coldant 时间: 2003-5-23 17:21 标题: 免疫组化用冰冻切片好还是石蜡切片好？

同题目。
我想用冰冻切片可以省去很多麻烦，比如抗原修复。但不知液氮保存的标本能用来做冰冻切片吗？怎样处理？
谢谢。

作者: shanghainese 时间: 2003-5-23 22:43 标题: 免疫组化用冰冻切片好还是石蜡切片好？

Hi couldant,
First, you have to know your antibody works on frozen or paraffin section, and then you can make decision to stain on what kind tissue section.
Let me find my Fast red and Methyl Green counter staining IHC slides, I will send these images to you.

作者: dingwei 时间: 2003-5-24 08:46 标题: 免疫组化用冰冻切片好还是石蜡切片好？

如果讲表达，冰冻好，有很多抗体只能做冰冻，不能做石蜡；讲定位，石蜡好。

作者: zhtp2003 时间: 2003-5-24 10:42 标题: 免疫组化用冰冻切片好还是石蜡切片好？

冰冻切片的优点是：能很好得很保持抗原活性（尤其是表面抗原）和酶。而且冰冻切片简便快速，省去固定、包埋、和切片后处理等一系列繁琐步骤。缺点：一般片子没有石蜡的清晰，最主要得是它不能用于回顾性研究，比如，你做临床取材就不太好办，标本来源是个问题！

作者: coldant 时间: 2003-5-25 11:40 标题: 免疫组化用冰冻切片好还是石蜡切片好？

谢谢大家，thank you, shanghainess.
我要作的c-kit蛋白，属于膜蛋白，标本是结肠。必须微波炉抗原修复。试了几次都不理想，只有1次有一张切片黏膜层出来了，但肌层脱片厉害，未观察到。我体会微波炉抗原修复很容易脱片。染了几张冰冻切片，全部都染出来了，但那次切片不好，只切了黏膜和黏膜下，每看到我想要的肌间神经丛。我觉得冰冻切片在200倍以下结构还是好的，但高倍下要差一些。
另外，有人说液氮保存的标本组织结构不好，应该先用OCT包埋再冷冻。我的标本都是直接冷冻的，不知冰冻切片如何？

作者: shanghainese 时间: 2003-5-25 11:59 标题: 免疫组化用冰冻切片好还是石蜡切片好？

各位朋友：你们好！
我是一位过路客，偶然的机会进入了贵网站和论坛。看到这里热火朝天，忍不住插几句嘴，请各位原谅。
多年前，我也和各位一样认为单克隆抗体不适合用于石蜡切片。现在看来这个观点不太正确。关于这个话题，以后找机会再谈。
不过，各位在工作中确实遇到这个问题。我的见解是：
1. 如果抗体是自己做的，只能试各种方法包括不同的 RETRIEVAL。
2. 如果抗体是买来的，请问明免疫组化的情况。不少公司虽然卖的是同样克隆的抗体，但是各自实力规模不同，有些有免疫组化资料，有些没有。各位也可上 MEDLINE 查找有关的文章。
另外，冰冻切片的质量，只要固定的好，不比石蜡差。
我们是用 OTC 包埋，液氮冷冻，储藏在负八十度低温。

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