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标题: 烤片的温度和时间对抗原影响 [打印本页]

作者: dingwei 时间: 2002-1-14 15:05 标题: 烤片的温度和时间对抗原影响

　　免疫组织化学染色的关键是抗原的保存，在处理切片过程中的每一个环节都可能造成抗原的丢失或减弱。为此，我们对烤片过程中可能影响抗原强弱的温度和时间进行测试，以确定最佳的烤片时间和温度。
一、材料和方法：
　　将白片分别放置在：55℃温箱中4小时，8小时，16小时；60℃温箱中4小时，8小时，16小时；65℃温箱中4小时，8小时，16小时；然后用几种不同的抗体进行免疫组织化学染色。
二、结果：

阳性细胞数强度
55℃ 4小时 80% +++
55℃ 8小时 80% +++
55℃ 16小时 80% +++
60℃ 4小时 80% +++
60℃ 8小时 80% +++
65℃ 4小时 70~75% ++
65℃ 4小时 80% +++
65℃ 8小时 70~75% +++~++
65℃ 16小时 70% ++
　　比较各种不同条件下染色的结果，我们发现烤片温度和时间对免疫组织化学染色都有不同程度的影响。当在55℃时，烤片时间对免疫组织化学染色影响并不十分明显，用肉眼一般不容易区别；而在60℃时，时间在16小时（相当于切片烤过夜），强度有明显差异，特别是在65℃，区别更加明显，阳性细胞数减少，强度减弱。所以，我们认为免疫组织化学染色的烤片时间应定在55℃温度下4-6小时，只有这样，才不会因为烤片温度或时间不够引起染色过程中脱片，又不会使抗原丢失或减弱，才能保证免疫组织化学染色结果的可靠性。

作者: zhoulili317 时间: 2007-7-24 10:09

我用的是武汉博士的抗体nmdar1,博士德技术支持建议我们60度烤片30分钟到六十分钟，请问烤片时间短会不会出现片子没干或者容易脱片啊

作者: shanghainese 时间: 2007-7-24 11:16

我们从来不烤片.

作者: mgdavid 时间: 2010-6-3 16:48

受教了
非常感谢

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