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标题: 关于免疫荧光细胞化学 [打印本页]

作者: 高山流云 时间: 2003-7-26 09:55 标题: 关于免疫荧光细胞化学

请教丁老师:
我做细胞骨架蛋白的免疫荧光细胞化学,一抗和二抗都用的是Sanda Crudz公司的,一抗浓度从1:100到1:600 都试过,可是背景染色还是很深,而胞浆内却没什么染色. 二抗我用稀释度是1:100,我的方法是
1.pbs 洗3分钟3次
2.甲醇固定20分钟
3.丙酮5分钟
4.pbs 洗3分钟3次
5.一抗37度1小时
6.pbs 洗3分钟3次
7.二抗37度1小时
8.pbs 洗3分钟3次
9.甘油封片
丁老师能帮我找找原因吗？二抗的稀释度是不是不合适?谢谢!

作者: dingwei 时间: 2003-7-26 11:25 标题: 关于免疫荧光细胞化学

1.pbs 洗3分钟3次
2.一抗37度1小时
3.pbs 洗3分钟3次
4.二抗37度1小时
5.蒸馏水洗3分钟3次
6.甘油封片
试一下。
如要固定，可在第一步用丙酮5分钟。

作者: 高山流云 时间: 2003-7-31 07:33 标题: 关于免疫荧光细胞化学

谢谢丁老师！我试试看！

作者: pathypmh 时间: 2003-8-6 21:26 标题: 关于免疫荧光细胞化学

所有步骤请在常温下

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