标题:
切片厚是不是脱片的一个重要原因
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作者:
lihua328
时间:
2004-4-2 09:47
标题:
切片厚是不是脱片的一个重要原因
我做的脑切片厚度为30微米，我也曾尝试着做玻片法，但是总是掉片：（
我的玻片是用了多聚赖氨酸处理的啊？？？
作者:
moon19912002
时间:
2004-4-2 21:18
标题:
切片厚是不是脱片的一个重要原因
30微米做玻片法,肯定要掉片的。我做8微米还掉，5微米就不掉了。切片厚是脱片的一个重要原因。
作者:
lihua328
时间:
2004-4-2 22:39
标题:
切片厚是不是脱片的一个重要原因
谢谢啦，我就说嘛：）
所以只能选择漂片啦！
那如果大鼠脑只切5－8微米的话，是不是就不好观察结构呢？？
作者:
moon19912002
时间:
2004-4-4 19:55
标题:
切片厚是不是脱片的一个重要原因
不会的，太厚才不容易观察结构。
作者:
fangdang
时间:
2004-4-5 09:31
标题:
切片厚是不是脱片的一个重要原因
我的玻片是用了多聚赖氨酸处理的啊？？？ 用了不如不用好。不是我咒你，就是5－8微米的话，还会有一大批会掉片。
作者:
lihua328
时间:
2004-4-5 11:44
标题:
切片厚是不是脱片的一个重要原因
是吗！
那大家为何不都来做漂片法，都不要担心掉片问题啦：）
作者:
lihua328
时间:
2004-4-5 11:46
标题:
切片厚是不是脱片的一个重要原因
引用:
下面引用由
moon19912002
在
2004/04/04 07:55pm
发表的内容：
不会的，太厚才不容易观察结构。
可我导师非得让我切这么厚，是什么原因阿？？
是不是好看突起些啊？
作者:
fangdang
时间:
2004-4-5 15:14
标题:
切片厚是不是脱片的一个重要原因
冰冻切片怎么漂片？？？
作者:
lihua328
时间:
2004-4-6 00:03
标题:
切片厚是不是脱片的一个重要原因
我就是用冰冻切片漂的呀？
您看看我的步骤是不是不对呀？（怕～～～～～～～～～～）
1、脑组织4％多聚甲醛灌注固定后，取材再固定2－24h
（由于疏忽，有的组织再固定到了48h－60h，不知这对免疫组化影响是不是很大？）
2、蔗糖脱水后——OCT包埋至－70度冰箱保存
3、恒温冷冻切片机切片，用载玻片收集，——至－70度冰箱保存
4、做组化时取出，然后浸入PBS，组织片便脱下来了——然后就可以漂片啦
fangdang 老师：你看这样是不是不妥当啊？需要怎么改进啊？
急盼赐教！！谢谢！！
作者:
fangdang
时间:
2004-4-6 11:37
标题:
切片厚是不是脱片的一个重要原因
因为脑组织含脂质较多不易与多聚赖氨酸结合。
作者:
lihua328
时间:
2004-4-6 17:09
标题:
切片厚是不是脱片的一个重要原因
噢，谢谢
我这样漂片法没错误吧？？您还没回答我啊，呵呵
作者:
fangdang
时间:
2004-4-7 10:03
标题:
切片厚是不是脱片的一个重要原因
你冰冻切片低温冷藏后PBS浸泡脱片，再进行捞片。也够折腾你的。为什么你不用原来的片子直接作免疫组化？还要再泡再捞，泡的开就说明组织和玻片黏附性较差，可能也只有脑组织能泡开吧？
作者:
lihua328
时间:
2004-4-7 12:02
标题:
切片厚是不是脱片的一个重要原因
不是我想折腾啊，我也想用玻片直接做，可在做的过程中一定会脱片！
其实我用PBS浸泡脱片，也不是一下子就能泡开的，我是用了一个自制工具把它弄下来的：）
作者:
fangdang
时间:
2004-4-7 15:51
标题:
切片厚是不是脱片的一个重要原因
就用重铬酸钾处理过洗干净的玻片，无须涂多聚赖氨酸，冰冻切片后摊在玻璃片上，置室温中一段时间后，再固定或冷藏。可以减少脱片率。
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