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作者: yang2000 时间: 2002-11-23 13:21 标题: [注意][求助]

细胞凋亡基因蛋白bax,bcl-2等按试剂盒说明操作,但非特异反应太多,寻求帮助!!!

作者: 临风揽月 时间: 2002-11-29 14:46 标题: [注意][求助]

是做免疫组化吗？

作者: yang2000 时间: 2002-12-1 21:10 标题: [注意][求助]

是免疫组化.

作者: yang2000 时间: 2002-12-1 21:41 标题: [注意][求助]

是小鼠子宫组织.波恩液固定,时间不定:24h-5天.
1、切片脱蜡至水
2、0.3%过氧化氢甲醇溶液阻断内源性过氧化物酶.37℃,20分钟.pH7.2 PBS洗三次，每次5分钟。
3、滴加super blocking,37℃,15分钟.
4、放入ph6.0柠檬酸盐抗原修复液内电炉隔水加热,抗原修复液温度到92℃时开始计时,20分钟,室温自然冷却.
5、滴加mouse-to-mouse blocking.37℃，15分钟。PBS洗3次，每次5分钟。
6、滴加非免疫正常血清37 ℃，15分钟。
7、甩去多余血清，加一抗（兔抗鼠）4℃过夜。PBS洗3次，每次5分钟。
8、滴加生物素化二抗（羊抗兔和鼠），37 ℃，30分钟。pBS洗3次，每次5分钟。
9、滴加HRP37 ℃，15分钟。PBS洗3次，每次5分钟。
10、棕色DAB显色1～5分钟。冲洗干净。
11、苏木素复染。约1分钟。冲洗干净。
12、脱水，透明，中性树胶封固。
有问题吗？？

作者: pipilong 时间: 2002-12-2 21:22 标题: [注意][求助]

降低2抗、3抗反应温度，适当延长反应时间

作者: dingwei 时间: 2002-12-5 20:01 标题: [注意][求助]

抗原修复后快速冷却。

作者: yang2000 时间: 2002-12-6 18:28 标题: [注意][求助]

谢谢。
我用的是电炉隔水加热，能快速冷却吗？我用的是室温自然冷却。

作者: pipilong 时间: 2002-12-6 20:38 标题: [注意][求助]

取出玻片架，冷水冲洗即可

作者: DINGWEI 时间: 2002-12-7 12:48 标题: [注意][求助]

直接用冷水冲冷。

作者: yang2000 时间: 2002-12-7 19:09 标题: [注意][求助]

我试试吧.谢谢!

作者: 豆豆 时间: 2002-12-11 11:05 标题: [注意][求助]

请问：super blocking 是什么？起什么作用？

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