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标题: 讨论:为何鼠一抗做鼠组织会有丰富的Background? [打印本页]

作者: fangdang 时间: 2004-11-23 20:23 标题: 讨论:为何鼠一抗做鼠组织会有丰富的Background?

话题一: 鼠单抗是世界上较为广泛的应用的抗体,老鼠经常被做为实验动物.但在免疫组化实验时二者结合为何会产生丰富的Background?

作者: fangdang 时间: 2004-11-26 21:47 标题: 讨论:为何鼠一抗做鼠组织会有丰富的Background?

我还以为大家对这个话题会有所讨论,没想到回音这么少,少到没有了,我的本意想通过这个讨论使大家在做科研课题时可以利用"共同抗原"而减少background的产生.

作者: fangdang 时间: 2004-12-1 22:45 标题: 讨论:为何鼠一抗做鼠组织会有丰富的Background?

为何鼠抗做鼠组织会产生较多的背景呢?1.鼠抗是鼠Ig(IgG,IgM),而鼠组织中也会有着非特异的Ig .两者在结构上有很大的相似.2.我们用的二抗为了识别一抗只能选择抗鼠IgG,所以在二抗结合一抗时也会结合上鼠组织中的非特异Ig而导致了背景的产生.
故在做用鼠抗进行鼠组织实验时必须选用特殊的试剂盒.

作者: fangdang 时间: 2004-12-1 22:47 标题: 讨论:为何鼠一抗做鼠组织会有丰富的Background?

以上只是自己拙见,有不足之处希望大家多多指导.

作者: shanghainese 时间: 2004-12-1 23:22 标题: 讨论:为何鼠一抗做鼠组织会有丰富的Background?

[这个贴子最后由shanghainese在 2004/12/02 07:46am 编辑]

如果将小鼠抗小鼠的一抗标上生物素，在小鼠的组织上做免疫组化(IHC)效果会更好。不知各位是否试过？
最好还是选择大鼠抗小鼠，仓鼠抗小鼠的单抗。或羊，兔等抗小鼠的多抗。

作者: ylzhao 时间: 2004-12-17 23:23 标题: 讨论:为何鼠一抗做鼠组织会有丰富的Background?

鼠源抗体用于鼠组织参考方案
http://www.chemicon.com/Product/ProductDataSheet.asp?TXTSEARCH=mouse+on+mouse&

roductItem=2710-S
http://www.vectorlabs.com/products.asp?catID=200&locID=143

作者: 小飞 时间: 2005-1-28 21:54 标题: 讨论:为何鼠一抗做鼠组织会有丰富的Background?

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作者: koukoukou 时间: 2005-5-10 01:30 标题: 讨论:为何鼠一抗做鼠组织会有丰富的Background?

确切的说，我现在就被这个问题所困惑。
1。做免疫组化，用多克窿的好，还是单克窿的好？
2。单克窿多数为小鼠单抗，能否用在大鼠组织上呢？答案似乎是可以，但是下一个问题是你再用什么试剂盒（二抗）？再用羊抗鼠或兔抗鼠的二抗检测试剂盒吗？似乎不行，这样所用的二抗“会结合上鼠组织中的非特异Ig而导致了背景的产生”。我在迈新的产品目录上看到了一个针对“小鼠单抗用在鼠组织”的检测试剂盒，要500多（120张片子），里面也没有说二抗是什么，而是写着“生物素化抗小鼠抗体”。
有没有人能够将里面的道理讲清楚呀？

作者: shanghainese 时间: 2005-5-10 03:41 标题: 讨论:为何鼠一抗做鼠组织会有丰富的Background?

引用:

下面引用由koukoukou在 2005/05/10 01:30am 发表的内容：
确切的说，我现在就被这个问题所困惑。
1。做免疫组化，用多克窿的好，还是单克窿的好？
2。单克窿多数为小鼠单抗，能否用在大鼠组织上呢？答案似乎是可以，但是下一个问题是你再用什么试剂盒（二抗）？再用羊抗 ...

单克隆特异性好，但许多单抗不能用于石蜡切片上。
如果您用小鼠抗大鼠的单抗，二抗选用抗小鼠，它不会与大鼠有交叉反应(除非质量不好)。做在大鼠组织上不会有问题。

作者: 闲云 时间: 2005-5-10 15:52 标题: 讨论:为何鼠一抗做鼠组织会有丰富的Background?

我觉得抗体单抗的结果好判定些吧！我们现在用的一抗多是单抗，二抗都是多克隆抗体，市面上的二抗也是多克隆的。
拙见：小鼠抗小鼠可能特异性不会很高吧！理论上说差别大的种属抗体效价应该高。

作者: shanghainese 时间: 2005-5-10 23:14 标题: 讨论:为何鼠一抗做鼠组织会有丰富的Background?

引用:

下面引用由闲云在 2005/05/10 03:52pm 发表的内容：
....
拙见：小鼠抗小鼠可能特异性不会很高吧！理论上说差别大的种属抗体效价应该高。

小鼠抗小鼠特异性不低，很高(不同的系)。
这类抗体不少。

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