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标题: HE染色细胞核模糊不清，切片裂痕明显，蜡块很硬很难切 [打印本页]

作者: 649545521 时间: 2021-12-27 12:37 标题: HE染色细胞核模糊不清，切片裂痕明显，蜡块很硬很难切

各位老师们我们科的HE染色效果很差，不知道是什么原因老师们能帮忙分析下原因嘛    HE染色出来的片子，细胞核很模糊
一、脱水程序如下
1）10%福尔马林 3H
2）75% 2H
3）85%乙醇 1H
4、5）95%乙醇各1H
6、7）无水乙醇各1H
8、9）二甲苯  各1H
10、11、12）三缸石蜡  分别 0.5H  1.5H  2H

二、切片常温自来水漂片、45.5℃自来水漂片
三、烤箱80℃烤片15分钟
四、二甲苯两道各1min——过梯度酒精——苏木素7min——盐酸酒精分化1-2S——自来水返蓝——伊红  15s ——过梯度酒精——封片

作者: 649545521 时间: 2021-12-27 13:57

更正
四、二甲苯两道各10min——过梯度酒精——苏木素7min——水洗——盐酸酒精分化1-2S——自来水返蓝——伊红 15s ——过梯度酒精——封片

作者: q567800 时间: 2021-12-27 15:37

1、组织前处理是否得当（1、固定液配置是否准确。2、标本离体后是否立即剖开固定。3、固定时间是否充足）
2、烤片温度过高时间过长（我们这是72°10分钟或65°15分钟）。
3、染液问题（1、染液是否新鲜。2、脱蜡二甲苯缸数太少时间太短。3、盐酸酒精分化后自来水冲洗是否充分）
不知是不是这些原因看是否能帮到你，也请各位大咖、老师们指正。

作者: dingwei 时间: 2022-1-24 20:33

可能是烤片时间太短

作者: judy1108 时间: 2024-9-1 14:41

感觉像脱水的问题，脱水前是否固定充分，脱水无水乙醇建议三道

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