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标题: HE染色细胞核模糊不清,切片裂痕明显,蜡块很硬很难切 [打印本页]

作者: 649545521    时间: 2021-12-27 12:37     标题: HE染色细胞核模糊不清,切片裂痕明显,蜡块很硬很难切

各位老师们 我们科的HE染色效果很差,不知道是什么原因   老师们能帮忙分析下原因嘛     HE染色出来的片子,细胞核很模糊   
一、脱水程序如下
1)10%福尔马林 3H
2)75%   2H
3)85%乙醇   1H
4、5)95%乙醇   各1H
6、7)无水乙醇   各1H
8、9)二甲苯  各1H
10、11、12)三缸石蜡  分别   0.5H  1.5H  2H

二、切片常温自来水漂片、45.5℃自来水漂片
三、烤箱80℃烤片15分钟
四、二甲苯两道 各1min——过梯度酒精——苏木素7min——盐酸酒精分化1-2S——自来水返蓝——伊红  15s ——过梯度酒精——封片
作者: 649545521    时间: 2021-12-27 13:57

更正
四、二甲苯两道 各10min——过梯度酒精——苏木素7min——水洗——盐酸酒精分化1-2S——自来水返蓝——伊红  15s ——过梯度酒精——封片

作者: q567800    时间: 2021-12-27 15:37

1、组织前处理是否得当(1、固定液配置是否准确。2、标本离体后是否立即剖开固定。3、固定时间是否充足)
2、烤片温度过高时间过长(我们这是72°10分钟或65°15分钟)。
3、染液问题(1、染液是否新鲜。2、脱蜡二甲苯缸数太少时间太短。3、盐酸酒精分化后自来水冲洗是否充分)
不知是不是这些原因看是否能帮到你,也请各位大咖、老师们指正。
作者: dingwei    时间: 2022-1-24 20:33

可能是烤片时间太短




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