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标题: 复染怎么总出问题?请教大家了 [打印本页]

作者: 小飞 时间: 2005-1-28 21:47 标题: 复染怎么总出问题?请教大家了

我免疫组化做好后可以看见阳性黄色但复染加苏木素半小时了细胞核都没染上,而整张片子都变成红色的了什么也看不见了,自来水冲洗要多长时间?是仅仅冲掉苏木素就可以了还是要泡半小时? 怎么细胞核都染不上呢? 谢谢大家!

作者: fangdang 时间: 2005-1-28 22:00 标题: 复染怎么总出问题?请教大家了

复染的苏木素最好是herry,s苏木素，衬染的时间很短，只要2－5min即可，返蓝时可用pbs冲洗可加速返蓝时间。

作者: 小飞 时间: 2005-1-28 22:15 标题: 复染怎么总出问题?请教大家了

我用苏木素染了半小时细胞核也没出来这是怎么回事?
用PBS?说明书上说是用自来水冲洗掉啊 ?

作者: liuhuaqin 时间: 2005-1-29 09:45 标题: 复染怎么总出问题?请教大家了

有些组织抗原修复过度，对比染色时不易着色。

作者: fangdang 时间: 2005-1-29 23:52 标题: 复染怎么总出问题?请教大家了

建议你用一张不作免疫组化的石蜡切片做一次he染色看看苏木素是否正常。

作者: 小飞 时间: 2005-1-30 15:54 标题: 复染怎么总出问题?请教大家了

哦谢谢各位我再试试看

作者: 小飞 时间: 2005-2-1 10:35 标题: 复染怎么总出问题?请教大家了

我苏木素做了张HE是好的没问题是不是抗原修复时候我用EDTA微波煮沸20分钟有影响? 可不可以修复时缩短时间煮沸就拿出来呢?
谢谢

作者: fangdang 时间: 2005-2-1 16:04 标题: 复染怎么总出问题?请教大家了

是不是抗原修复时候我用EDTA微波煮沸20分钟有影响?我认为没有很大的影响，因为组织片在碱性环境的抗原修复后，PH值会有所变化，但是之后的pbs缓冲液冲洗后组织片应该为中性环境。

作者: liuhuaqin 时间: 2005-2-1 17:48 标题: 复染怎么总出问题?请教大家了

免疫组化对比染色核不易着色，多见于修复过度，尤其是压力锅修复较长的标本。我建议你用微波中火连续10分钟即可。

作者: 小飞 时间: 2005-2-1 20:26 标题: 复染怎么总出问题?请教大家了

我想可能是微波抗原修复时间过长对细胞核与影响破坏吧是否应该缩短时间
有人说著沸就拿出来冷却20分钟即可这样可以吗

作者: hunter3035 时间: 2005-2-1 23:12 标题: 复染怎么总出问题?请教大家了

我们还煮沸半小时那,也没说核不着色.估计还是你的PH值出问题了.

作者: 小飞 时间: 2005-2-2 14:42 标题: 复染怎么总出问题?请教大家了

我用的是PH试纸检测的是不是不准啊?可以吗?

作者: liuhuaqin 时间: 2005-2-2 22:15 标题: 复染怎么总出问题?请教大家了

任何热修复完成后，切片不能直接从修复液中取出，都应隔离火源，在修复液中室温保持20分钟。pH试纸检测修复液的pH值，问题不是太大。

作者: 小飞 时间: 2005-2-3 16:05 标题: 复染怎么总出问题?请教大家了

哦谢谢各位了!!

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