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标题: 求助丁老师和其他高手 [打印本页]

作者: wx00qm    时间: 2005-7-6 15:38     标题: 求助丁老师和其他高手

丁老师:
   最近我在做大鼠骨骼肌和心肌结蛋白(DESMIN)的免疫组化,石蜡切片,所用试剂盒是博士德公司的,虽然可以出阳性结果,但非特异性染色非常高,请您能否指点一下,谢谢!
步骤:1,58度石蜡包埋,切片后60度烤片两小时,二甲苯两道个十分钟,100,90,80酒精各五分钟,然后蒸馏水浸泡五分钟,
   2,3%双氧水封闭10分钟,PBS洗3次,
   3,抗原修复,单纯加热,PBS洗3次,
   4,BSA封闭30分钟,然后加一抗过夜,
以下均按照试剂盒要求
   以前我一抗浓度为1:100,但现在为1:300,但背景还是高,我周围老师和我说要用超纯水来配制PBS,而且所用瓶子等每次都要高压,而我只是用双蒸水,而且瓶子也是洗净后高压了一次就反复使用了,这样可以吗?
   不好意思,我很罗嗦,因为现在我被这染色搞的头很疼!
作者: wx00qm    时间: 2005-7-6 15:41     标题: 求助丁老师和其他高手

我没法上传图片,丁老师是否可以给我您的EMIAL,谢谢:)
作者: dingwei    时间: 2005-7-6 20:52     标题: 求助丁老师和其他高手

hzdw@163.net
作者: shanghainese    时间: 2005-7-6 23:49     标题: 求助丁老师和其他高手

看看您的阴性对照如何?
作者: wx00qm    时间: 2005-7-9 10:51     标题: 求助丁老师和其他高手

如果阴性对照不好,是不是说明试剂不行?谢谢?
作者: shanghainese    时间: 2005-7-9 11:43     标题: 求助丁老师和其他高手

引用:
下面引用由wx00qm2005/07/09 10:51am 发表的内容:
如果阴性对照不好,是不是说明试剂不行?谢谢?
说明你所用的显色系统有问题。
作者: fangdang    时间: 2005-8-28 10:41     标题: 求助丁老师和其他高手

shanghainese  老师说的对。这种结果可能是一抗,和检测系统选择的结果。




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