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标题: [求助]有关微波修复的火档 [打印本页]

作者: cnuwwb 时间: 2005-10-8 23:48 标题: [求助]有关微波修复的火档

请问微波修复时应用哪个档为,我们为800W,分低火,解冻,中低,中,中高,高,6个档,
修复时共要微波几次? 每次几分钟为宜? 是否一定要沸腾?
每次间是否要等到自然冷却到室温才能再放入微波炉中?
听说高压修复好?是吗?我用的是SABC法,抗原是tgfb,il-1b,er,pr

作者: fangdang 时间: 2005-10-9 11:30 标题: [求助]有关微波修复的火档

高火煮沸，放入组织，低火维持沸腾。

作者: cnuwwb 时间: 2005-10-9 23:02 标题: [求助]有关微波修复的火档

怎么排净,是放在玻片架上空一会吗?

作者: fangdang 时间: 2005-10-10 14:01 标题: [求助]有关微波修复的火档

怎么排净,是放在玻片架上空一会吗?
我不太懂你的意思，能否说具体一些？

作者: cnuwwb 时间: 2005-10-10 15:58 标题: [求助]有关微波修复的火档

对不起,粘贴错了.谢谢了,我这几天刚开始做免疫组化,一微波加热总是脱片,十张能脱7张,我也是用多聚赖氨酸包被的.不过我修复时是用中火5分钟,等降至室温后再添满edta(0.001mol/l,ph=8.0),低火7分钟,倒是不会耗干至组织的位置

作者: 闲云 时间: 2005-10-10 16:00 标题: [求助]有关微波修复的火档

[quote]下面引用由fangdang在 2005/10/10 01:01pm 发表的内容：
怎么排净,是放在玻片架上空一会吗?

排什么净？
修复液多加些，中间可不用再补充水的，我就不用修复盒，直接用个大烧杯，用保鲜膜盖上，得插几个洞排气哈！一样得效果！也不麻烦，不信试试！

作者: 闲云 时间: 2005-10-10 16:03 标题: [求助]有关微波修复的火档

哈哈！你搞得快！我就说吗，怎么看不懂！EDTA很容易掉片，还是用柠檬酸盐得了！中低火就可以了！

作者: xuyi010911 时间: 2005-10-11 00:49 标题: [求助]有关微波修复的火档

我用的迈新的多聚赖氨酸均匀的涂在载玻片上，等到多聚赖氨酸干了以后就可以用了，不会掉片的，修复我用的高温高压修复法，是现在推荐的用法，比较可靠

作者: fangdang 时间: 2005-10-12 12:54 标题: [求助]有关微波修复的火档

EDTA修复掉片？小功率，温度维持>90－100度，既保持沸腾又不掉片大家可以试试。

作者: 又红又亮 时间: 2005-10-12 21:03 标题: [求助]有关微波修复的火档

微波修复主要是修复液的温度
大火修复到100度
然后小火保持
时间和微波炉的功率有关

作者: 恒恒 时间: 2005-10-28 12:13 标题: [求助]有关微波修复的火档

请问枸缓与柠檬酸盐缓冲液哪个做修复液，修复效果有不同么，哪个比较好

作者: 闲云 时间: 2005-10-28 14:05 标题: [求助]有关微波修复的火档

引用:

下面引用由恒恒在 2005/10/28 11:13am 发表的内容：
请问枸缓与柠檬酸盐缓冲液哪个做修复液，修复效果有不同么，哪个比较好

？？？？？

作者: shanghainese 时间: 2005-10-28 14:23 标题: [求助]有关微波修复的火档

引用:

下面引用由恒恒在 2005/10/28 11:13am 发表的内容：
请问枸缓与柠檬酸盐缓冲液哪个做修复液，修复效果有不同么，哪个比较好

枸橼酸就是柠檬酸。枸橼酸缓冲液就是柠檬酸缓冲液。两者没有区别。

作者: 恒恒 时间: 2005-11-8 21:17 标题: [求助]有关微波修复的火档

谢谢shanghainese ，刚刚开始做免疫组化，还望多多执教。
还有几个问题想请教一下仁兄：1.枸橼酸和PBS配置多久就不能用了，一定要4度保存么;2.怎么判断这两种容易不能用了（变质），如果使用了，对结果会用怎样的影响？
谢谢！！！

作者: shanghainese 时间: 2005-11-9 04:45 标题: [求助]有关微波修复的火档

引用:

下面引用由恒恒在 2005/11/8 08:17pm 发表的内容：
谢谢shanghainese ，刚刚开始做免疫组化，还望多多执教。
还有几个问题想请教一下仁兄：1.枸橼酸和PBS配置多久就不能用了，一定要4度保存么;2.怎么判断这两种容易不能用了（变质），如果使用了，对结果会用　...

1.不好说，因为各自的环境条件不一样。我们一般在4度保存么一个月左右。
2.枸橼酸和PBS里容易生长真菌和其它细菌。另外pH值的改变也很重要。
3. 如果使用了，我也不知道会有什么影响？

作者: rich1856 时间: 2005-11-9 21:56 标题: [求助]有关微波修复的火档

我们用的是sp法，不同的抗体用不同的修复方法，有的可以不用，如果用微波的话我们一般采用高温5min两次，一般还能保留一点修复液，注意千万不能烤干啊！！！

作者: 恒恒 时间: 2005-11-10 11:09 标题: [求助]有关微波修复的火档

谢谢各位，昨天实验过程中突然发现组织中缺掉了一部分，会是什么原因，是修复（微波炉中高档，5minx2次）过度或者。。。

作者: 奕夫 时间: 2006-3-21 19:49 标题: [求助]有关微波修复的火档

枸椽酸缓冲液与柠檬酸缓冲液是一回事

作者: 一抹幽兰 时间: 2006-4-4 15:21 标题: [求助]有关微波修复的火档

脱片和包埋，捞片的过程有关，我做的以前就用的枸橼酸修复，几乎全部脱片，后来就改用酶消化了，但是不知道为什么大家都是喜欢用热修复，而用酶消化的很少。一起做实验的也有改用PBS修复的，效果也有所好转。

作者: storm81 时间: 2006-4-29 19:01 标题: [求助]有关微波修复的火档

我曾经看过一篇关于微波抗原修复的文章，它是这么写的：格兰仕微波炉--中火3.5分钟，中低火3.5分钟，低火3分钟，共十分钟。我也是刚开始做免疫组化，试了几次还好，没有掉片现象。大家可以试试

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