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标题: 中性缓冲福尔马林影响HE染色 [打印本页]

作者: scx 时间: 2005-5-29 13:19 标题: 中性缓冲福尔马林影响HE染色

其他条件不变，因使用LeicaASP200 固定液改用中性缓冲福尔马林，制片后染色苏木素7min（Harris）发灰，伊红4min（1%水溶性）脱水时易掉色。原来AAF固定组织处理后染色效果未出现此问题。丁老师及各位同行请介绍修正办法。

作者: liuhuaqin 时间: 2005-6-15 11:21 标题: 中性缓冲福尔马林影响HE染色

我们没发现，是否有其它原因？

作者: dingwei 时间: 2005-6-28 06:48 标题: 中性缓冲福尔马林影响HE染色

用中性缓冲福尔马林后，细胞核颜色的确不够鲜艳，可在染苏木素前用3%冰醋酸媒染10分钟，会有所改善。

作者: hunter3035 时间: 2005-7-22 23:26 标题: 中性缓冲福尔马林影响HE染色

我们的经验到好象是你分化不好,要不就是水份残留.

作者: ChenRong 时间: 2005-7-25 22:52 标题: 中性缓冲福尔马林影响HE染色

我用我自己配的《4%缓冲中性甲醛》暂无此现象 :em17: :em17:

作者: dingwei 时间: 2005-7-26 23:27 标题: 中性缓冲福尔马林影响HE染色

为什么这么多人说没影响，而我们这颜色就是不一样，不知是什么原因？

作者: hunter3035 时间: 2005-7-29 21:45 标题: 中性缓冲福尔马林影响HE染色

真的有影响???那看来以前出现的染色问题不是我的错了,肯定在制剂室出问题了.

作者: 临风揽月 时间: 2005-8-2 19:42 标题: 中性缓冲福尔马林影响HE染色

真的有影响，我们的胃镜有时候染色，细胞核就像是给水泡过的一样，发白！

作者: dingwei 时间: 2005-10-1 22:30 标题: 中性缓冲福尔马林影响HE染色

结果和我们的一样

作者: cnuwwb 时间: 2005-10-9 11:06 标题: 中性缓冲福尔马林影响HE染色

我们苏木精11分钟,分化24秒,1%氨水2秒,伊红20秒感觉还可以,可以试试

作者: dingwei 时间: 2005-12-7 08:51 标题: 中性缓冲福尔马林影响HE染色

胃镜细胞核就像是给水泡过的一样,往往是胃镜室固定胃镜的浓度不对。而宫内膜就很难说，可能是组织关系，很多人反映，因为我们此标本太少，没有经验，不知那位有解决的办法，谢谢。

作者: RNA 时间: 2006-1-5 19:38 标题: 中性缓冲福尔马林影响HE染色

宫内膜水分太多，固定液应该提高浓度，不防试试

作者: hunter3035 时间: 2006-2-16 19:08 标题: 中性缓冲福尔马林影响HE染色

想请教一下各位,大家说的细胞核组织发白是整张片子都白那,还是部分区域的细胞核是这个样子?我们的是部分区域,而且这种情况都出现在胃镜和五官科的新生物等小标本上.有没有好的解决办法啊?

作者: 李锦梅 时间: 2010-8-20 23:39 标题: 进饱和碳酸锂为什么为掉片

我按以前的盐酸酒精分化后,进饱和碳酸锂后切片就掉,不知道是哪能个环节出了错

作者: histotechnology 时间: 2010-10-12 08:22 标题: 回复 3# 的帖子

特别是胃和肠粘膜颜色一点不鲜艳

作者: 大志 时间: 2010-10-27 22:07 标题: 中性缓冲福尔马林影响HE染色（图）

这个问题我也遇到过，郁闷了好一阵子。最后终于发明了独家秘方，自认为攻克了此项难题！
呵呵，开玩笑啊！！进入正题，食管和胃黏膜活检组织细胞核像是给水泡过的一样,灰蒙蒙，核染色质不清。我亲自给他们配的中性缓冲福尔马林，不存在浓度不精确。同批其他标本无此现象，原以为是胃镜室固定不及时，后排除。后改为75%酒精固定，染色有所改善，但组织稍硬，细胞有收缩现象。后来试着用甲醛原液一份加75%乙醇九份固定，觉得效果还行。发图与大家分享，请丁老师与大家指正！！
图1-5为中性缓冲福尔马林固定，图6-9对照。

[ 本帖最后由大志于 2010-10-27 22:13 编辑 ]

作者: dingwei 时间: 2010-10-28 07:38

你这是改良的AF液，只是为了HE染色好，违背了中性缓冲福马林的目的和原则，醇固定对免疫组化还是有影响的，象Her-2指南里就明显规定不能用醇固定。与其这样，还不如直接用福马林加冰醋酸，效果更好，而且胃镜做分子病理的不会多，问题应该不大。

作者: 大志 时间: 2010-10-28 16:46

是的，好在只是在胃镜标本中应用。福马林加冰醋酸固定胃粘膜我试过，效果并不好。不知我图片上反映的问题和大家的是否相同。

作者: dingwei 时间: 2010-10-28 20:32

片子质量不错，很有创意，很好，可以一试。
3%冰醋酸福马林固定液我们以前用过，核结构非常清晰，效果应该还可以，是不是脱水时间不够呢？你再试一下。

作者: luo 时间: 2010-10-29 19:12

我们也发现了10%中性福尔马林固定之后，核不易着色的问题，现在既然许多等级医院都要求使用这个，难道没有考虑到这个问题吗？除了这个选择之外，没有其他选择了吗？

作者: luo 时间: 2010-10-29 19:17

对了，最近看到从一家医院带出的标本用的是戊二醛固定的，不知道浓度和配方，不知道有什么优点？

作者: dingwei 时间: 2010-11-1 15:05

可能是那家医院没有福马林，只有消毒用的戊二醛，所以用戊二醛固定了。戊二醛渗透速度较慢，固定时需要氧气的参与反应，因此在大块样品的内部无法形成稳定的生成物，会导致样品内部的固定效果不佳。一般只适合于小块组织的固定，常用于电镜组织的固定。

作者: luo 时间: 2010-12-9 07:46

继续学习，发灰的现象又出现了

作者: luo 时间: 2010-12-9 09:21

上传一个图片给大家看看。

作者: chenyaqin 时间: 2010-12-9 11:15 标题: 中性缓冲福尔马林影响HE染色

学习了，继续关注。

作者: dingwei 时间: 2010-12-9 20:53

适当延长固定时间会好一点。

作者: 87723511 时间: 2010-12-23 20:58

学了一点

作者: 成科890101 时间: 2010-12-28 09:05

学了一点

作者: nancy.carter 时间: 2011-2-2 23:28

前几张的光线暗后面的亮

作者: wosniqd112233 时间: 2011-2-15 21:48

又学了一招

作者: gao314159 时间: 2011-3-2 13:18 标题: 回复 24# 的帖子

感觉这个不是很明显啊

作者: 强子 时间: 2011-3-9 16:47

回头试试

作者: 六月的太阳 时间: 2011-3-19 19:18

丁老师你讲的用中性缓冲液固定后，脱水前用百分之十福尔马林固定2小时，会不会破坏抗原效果好吗、

作者: dingwei 时间: 2011-3-20 11:29

从理论上会，但影响很小，差异用肉眼一般鉴别不出来。

作者: 六月的太阳 时间: 2011-3-20 12:03 标题: 提问

影响免疫组化吗谢谢

作者: 六月的太阳 时间: 2011-3-20 12:43 标题: 胸水

丁老师
胸腹水去红细胞用百分之50酒精离心后..涂片用95酒精固定染色后红细胞没了但是细胞变形细胞浆破了光剩细胞核.什么原因哪

作者: 一个人的生活 时间: 2012-1-19 18:01 标题: 回复 9# 的帖子

没有影响

作者: 无聊的雪 时间: 2012-1-26 23:33

=======

作者: JOJOwowo 时间: 2012-1-27 12:36

路过

作者: dingwei 时间: 2012-1-29 11:23

引用:

原帖由 六月的太阳 于 2011-3-20 12:43 发表
丁老师
胸腹水去红细胞用百分之50酒精离心后..涂片用95酒精固定染色后红细胞没了但是细胞变形细胞浆破了光剩细胞核.什么原因哪

是的，的确会这样，因此不是细胞非常少，一般不要用。

作者: 小平平 时间: 2012-3-13 19:51

我们也出现这样的情况！诊断医生老是反映小标本染色不鲜艳！我说是中性福尔马林搞的鬼他们不信！他们都说中性好！
回来我就用4%甲醛固定好像比较好了！

作者: 专心工作 时间: 2013-11-10 15:40

引用:

原帖由 luo 于 2010-12-9 09:21 发表
上传一个图片给大家看看。

麻烦老师把组织c处理步骤贴出来，学习一下呗！

作者: wakenlover 时间: 2013-12-9 12:47 标题: 回复 3# 的帖子

丁老师能不能解释一下冰醋酸媒染的原理呢？谢谢

作者: 小刚 时间: 2013-12-13 16:32

引用:

原帖由 liuhuaqin 于 2005-6-15 11:21 发表
我们没发现，是否有其它原因？

作者: 人生好求 时间: 2013-12-27 20:15 标题: 伊红要染这么久吗

作者: ddyyff559 时间: 2014-3-19 09:10

确实有影响，存在染色不够鲜艳，发挥现象，个人觉得还是普通的10%福尔马林实用

作者: 郭建红 时间: 2014-4-29 17:39

制剂室的人不靠谱，有段时间我们自己配固定液

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