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标题: 如何去除冰冻切片中的空泡 [打印本页]

作者: terry 时间: 2003-5-20 01:05 标题: 如何去除冰冻切片中的空泡

本人目前正用冰冻切片作免疫组化，制作切片过程如下:4%多聚甲醛灌注，取大鼠眼球，去除眼前节，继续在4度用4%多聚甲醛固定过夜，流水冲洗数小时，入10%蔗糖4度1小时，入30%蔗糖过夜，OCT包埋，置于零下20度保存，恒冷切片机切片，厚10-20微米。但切片中出现大量空泡，简直惨不忍睹，本人多次实验，无论灌注与否、保存时间长短、是否丙酮固定切片、是否封片前酒精脱水，空泡仍决不消失，请教坛主与众高手可有良方？万望不吝赐教！
三叩首！

作者: shanghainese 时间: 2003-5-22 07:36 标题: 如何去除冰冻切片中的空泡

Your problem is OTC embedding and store. Please frozen your block at liquid nitrogen and store it at –70 degree.

作者: dingwei 时间: 2003-5-24 08:42 标题: 如何去除冰冻切片中的空泡

做冰冻切片，先用4%多聚甲醛灌注，是一个错误。你用新鲜的试一下。

作者: shanghainese 时间: 2003-5-31 01:18 标题: 如何去除冰冻切片中的空泡

terry ,
切片中出现大量空泡是 ice crystal, OCT包埋冰冻零下20度保存有问题, 请用液氮冰冻零下70-80度保存。

作者: 王挺 时间: 2003-7-11 20:14 标题: 如何去除冰冻切片中的空泡

固定应快.越新鲜越好.

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