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标题: 体液涂片的制作 [打印本页]

作者: dingwei 时间: 2003-7-10 22:10 标题: 体液涂片的制作

[这个贴子最后由dingwei在 2003/07/10 10:13pm 编辑]

体液涂片的制作
体液脱落细胞学是一个方便而实用的病理学检查，传统的涂片方法，由于操作不当，会造成制片质量欠佳，细胞核结构不清，影响阳性细胞检出率。现将我科经验介绍如下：
1、涂片制作方法：（根据送检液体外观不同，三个方法制作）
1.1当送检液体黄色略显混浊（细胞成份多）或淡红色（只含少量红细胞）时可用普通离心涂片法：吸取两试管液体各10毫升，平衡，放入离心机，3000转/分，时间5～10分钟。离心后将试管内液体倒干，倒置于吸水纸上20秒钟，吸去管口剩余液体，然后再用吸管吸取沉淀物涂片。这样做的片子，由于水份少，所以细胞成份多，并且比较集中。
1.2当送检液体较清（细胞成份少），送检量少于50毫升时，可用重复离心法或滤过膜法：细胞离心后倒去上清液，再加入未离心的液体，反复多次，最后吸干剩余液体用吸管吸取沉淀物涂片。这样可以增加细胞的数量。滤过膜法：去除细胞采集器上抽吸部分，将注射器直接连在滤过器上，拔去内芯，在体液内以1：1的比例加入50%的酒精，混合后，倒入注射器内，体液通过滤膜从另一端流出，直至体液停止流动为止。倒去注射器内残留体液，取出滤膜，将滤膜细胞面向上放于刚倒上95%酒精的纸上，用载玻片压在膜上（此时，细胞和滤膜均粘在玻片上），然后去除滤膜，立即固定。
1.3如果送检标本有大量的红细胞,可用50%酒精等量混合后,再用普通离心涂片法制片。结果红细胞被溶解，肿瘤细胞大量增多，细胞形态保存完好。
1.4 涂片的固定：
细胞制成片后，立即放入固定液（95%酒精与甲醇1:1混合）固定。如干燥后再固定的涂片容易造成细胞核退变，核仁不清，核膜不明显，核染色质模糊等现象。
2、讨论：
传统的离心涂片制作，往往倒去上清液后，试管壁上还有大量液体，当沉淀物吸出时，这些液体也跟着被吸出，稀释了细胞，涂片后细胞数量少，细胞分散，而且由于水份多，不能立即固定，细胞核固缩或退变，影响诊断。而细胞含量少的液体，离心的量不可能很多，每次只能检查20ml左右，往往整张涂片只有几只细胞，极容易漏诊。如遇到血性液体时，沉淀物中有大量的红细胞，有时整片涂片都是红细胞，影响了癌细胞的检测率。当在有血的体液内等量加入50%酒精后，红细胞被溶解，而滤膜技术的应用，可以处理大量的液体（在500mL以内），增加了细胞的数量，阅片时省时省力，减少了漏诊率的发生，从而提高了阳性率。95%酒精与甲醇1：1混合固定液，可减少湿片固定时细胞过渡收缩或脱落。湿片固定保正了细胞的原有的形态，核仁明显，核膜及染色质清晰，有利于细胞性质的准确判断。
参考文献:
1. 梁惠珍，吴惠茜. 血性胸腹水涂片制作技术的探讨. 临床与实验病理学杂志,1999;15(5):466
2. Ciesla Marlyn C. Guidos Barbara J. Selvaggi Suzanne M. Cytomorphology of small-cell (neuroendocrine) carcinoma on ThinPrep(R) cytology as compared to conventional smears. Diagnostic Cytopathology, 24(1). January, 2001. 46-52.
3. Vassilakos. Comparing liquid-based, thin-layer preparation devices: Dr. Vassilakos replies. Journal of Reproductive Medicine, 45(11). November, 2000. 967-968.
4. Linder James. Comparing liquid-based, thin-layer preparation devices. Journal of Reproductive Medicine, 45(11). November, 2000. 966-967.

作者: dingwei 时间: 2003-7-10 22:15 标题: 体液涂片的制作

[这个贴子最后由dingwei在 2003/07/10 10:17pm 编辑]

湿固定的尿脱落细胞学。

作者: dingwei 时间: 2003-7-10 22:16 标题: 体液涂片的制作

干燥后再固定的

作者: 若水 时间: 2003-8-12 19:49 标题: 体液涂片的制作

您的方法“1.3如果送检标本有大量的红细胞,可用50%酒精等量混合后,再用普通离心涂片法制片。结果红细胞被溶解，肿瘤细胞大量增多，细胞形态保存完好。”我曾试过，50％的酒精混合后，红细胞不但没溶解，反而都凝成了絮状沉淀，离心后半试管的血凝块，洗都洗不掉。您自己试过吗？还是以上过程漏写了什么步骤？
其他几种方法，我再试试看。

作者: dingwei 时间: 2003-8-21 22:54 标题: 体液涂片的制作

如果送检的胸水血太多了，可先在试管内加半试管的50%酒精，再吸取血性胸水滴加入试管，等酒精变成粉红色就离心，离心后红细胞会变成白色，倒去，吸取底下少量沉淀物涂片，至于试管我们都是一次性的，不洗。

作者: wjp523 时间: 2003-12-14 22:36 标题: 体液涂片的制作

"细胞制成片后，立即放入固定液（95%酒精与甲醇1:1混合）固定。如干燥后再固定的涂片容易造成细胞核退变，核仁不清，核膜不明显，核染色质模糊等现象"
dingwei 老师,细胞会脱落吗?固定的时间是多少?我一般是阴干后染色可是习惯了,此法我试试..

作者: DINGWEI 时间: 2003-12-16 20:54 标题: 体液涂片的制作

主要是离心后的沉淀水份要吸干。固定半小时。

作者: zgx 时间: 2004-1-4 22:38 标题: 体液涂片的制作

丁老师,看过你发表的体液细胞涂片的文章后学到不少东西,但是我也有些疑问:
1.重复离心法会不会造成细胞形态的破坏?
2.血性体液能否用冰醋酸溶解红细胞且可固定有核细胞?
请指教,谢谢!

作者: ketty 时间: 2004-1-6 21:36 标题: 体液涂片的制作

引用:

下面引用由zgx在 2004/01/04 10:38pm 发表的内容：
丁老师,看过你发表的体液细胞涂片的文章后学到不少东西,但是我也有些疑问:
1.重复离心法会不会造成细胞形态的破坏?
2.血性体液能否用冰醋酸溶解红细胞且可固定有核细胞?
请指教,谢谢!

有同感！

作者: xamyyly 时间: 2004-4-5 08:14 标题: 体液涂片的制作

滤膜哪里能买到?

作者: dingwei 时间: 2004-4-10 15:58 标题: 体液涂片的制作

1.重复离心法不会造成细胞形态的破坏
2.不能固定，涂成片后还须固定

作者: hunter3035 时间: 2005-11-13 21:09 标题: 体液涂片的制作

丁老大,请教个问题:细胞涂于玻片上立即固定,染出来后片上好象就没有多少细胞了,都被洗掉了.我们先涂片然后等干再固定,按上所述有不能达到诊断效果.
请问如何是好.

作者: 唐平 时间: 2005-11-23 20:03 标题: 体液涂片的制作

谢谢老师！我个人认为冰醋酸溶解红细胞效果显著，我试过几次

作者: 阿旺 时间: 2005-12-6 23:10 标题: 体液涂片的制作

冰醋酸的含量是多少为好？此时既无酸味，又能达到溶解红细胞的目的。

作者: dingwei 时间: 2006-1-3 20:59 标题: 体液涂片的制作

引用:

下面引用由hunter3035在 2005/11/13 08:09pm 发表的内容：
丁老大,请教个问题:细胞涂于玻片上立即固定,染出来后片上好象就没有多少细胞了,都被洗掉了.我们先涂片然后等干再固定,按上所述有不能达到诊断效果.
请问如何是好.

离心后管的还有液体的原故。把管内水吸干，吸出的沉淀物应该是干的，细胞就不会掉

作者: 又红又亮 时间: 2006-1-4 19:43 标题: 体液涂片的制作

检验科尿沉渣涂片去除红细胞是用10%冰醋酸的

作者: 唐平 时间: 2006-1-8 15:04 标题: 体液涂片的制作

１０ＭＬ待检液加０．５ＭＬ滴冰醋酸，就可以呀

作者: dingwei 时间: 2006-2-27 22:52 标题: 体液涂片的制作

冰醋酸效果不错

作者: wzqyqp 时间: 2006-4-20 09:05 标题: 体液涂片的制作

好文章！有一种“众里寻她千百度”的感觉！

作者: yegou 时间: 2007-4-19 15:30

引用:

原帖由 zgx 于 2004-1-4 22:38 发表
丁老师,看过你发表的体液细胞涂片的文章后学到不少东西,但是我也有些疑问:
1.重复离心法会不会造成细胞形态的破坏?
2.血性体液能否用冰醋酸溶解红细胞且可固定有核细胞?
请指教,谢谢!

我加冰醋酸溶解红细胞后会觉得　上皮细胞有点粘成团，特别是５％，有时候只加２％还好点，

作者: guo_xiao9 时间: 2009-4-7 23:50

我加的冰醋酸效果还可以。可是加50%酒精效果不明显。不知道为什么？

作者: 白雪 时间: 2009-4-11 02:16

引用:

原帖由 guo_xiao9 于 2009-4-7 23:50 发表
我加的冰醋酸效果还可以。可是加50%酒精效果不明显。不知道为什么？

真佩服你的毅力!这么老的帖子都翻出来了?

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