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标题: [讨论]请教:如何作出好的细胞学的免疫组化... [打印本页]

作者: chenrong 时间: 2003-7-23 19:44 标题: [讨论]请教:如何作出好的细胞学的免疫组化...

如何作出好的细胞学的免疫组化... :em14: :em14: :em14: :em14:

作者: shanghainese 时间: 2003-7-23 23:23 标题: [讨论]请教:如何作出好的细胞学的免疫组化...

不知您说的是脱离细胞还是培养细胞？我作过培养细胞，只要将细胞长在或粘在栽玻片上就行了。然后固定，染色与免疫组化一样。

作者: chenrong 时间: 2003-7-23 23:34 标题: [讨论]请教:如何作出好的细胞学的免疫组化...

脱落细胞,<胸,腹水.尿液等.>在固定方面呢!!! :em17: :em17:

作者: shanghainese 时间: 2003-7-23 23:45 标题: [讨论]请教:如何作出好的细胞学的免疫组化...

对不起，没作过。我想固定应与抗体有关，有的可用福尔马林，有的只可用丙酮。

作者: dingwei 时间: 2003-7-26 11:20 标题: [讨论]请教:如何作出好的细胞学的免疫组化...

血多的液体很维做，我也正在摸索。请大家提供一个好办法。

作者: shanghainese 时间: 2003-7-28 22:27 标题: [讨论]请教:如何作出好的细胞学的免疫组化...

血多的液体是很难做，我没有作过，但是红细胞会产生非特异性染色。丁先生不妨用分离或溶解红细胞的方法去除红细胞。比如搞免疫的人在外周血里加溶解液溶解掉红细胞，然后离心分离出白细胞。我想您可以试试用在脱落细胞学上。不过成本要增加一些。

作者: dingwei 时间: 2003-7-28 22:41 标题: [讨论]请教:如何作出好的细胞学的免疫组化...

试过，正在此方向努力，就是效果不佳。谢谢指导。最好能把红细胞分离，而不是溶解。有没好的办法？

作者: shanghainese 时间: 2003-7-29 00:15 标题: [讨论]请教:如何作出好的细胞学的免疫组化...

用没用过Ficoll-Hypaque 分离液？没用过可以试试。
1 复温Ficoll-Hypaque 22-25°C。
2 加 5 mls Ficoll-Hypaque 入15 ml 圆锥型离心管内。
3 慢慢地加 10 mls 标本到 5 mls Ficoll-Hypaque 上层(面)，别让两层液体相混了。
4 离心 1600-1800 转/分 (500xg) 室温 15-20 分钟.
NOTE:Raise the centrifuge speed slowly and gradually, about 3 minutes, from 0 to 1600 rpm (500xg). Be sure the break is off.
5 Carefully remove top layer, discard and transfer the cells at the interface of the solutions into a clean 50 ml conical tube.

作者: coco7226 时间: 2003-8-13 20:02 标题: [讨论]请教:如何作出好的细胞学的免疫组化...

甲醇的固定应是比较好的

作者: fangdang 时间: 2003-9-3 11:20 标题: [讨论]请教:如何作出好的细胞学的免疫组化...

我原想搞一些关于免疫组化在细胞病理学中的应用之类的题目.但是后来自己把原观点放弃了.因为细胞学除了细胞培养.很难确定片中是否存有待查抗原..因为涂片.存有概率问题.假阳性难以区别.

作者: tlzhou 时间: 2004-6-29 20:07 标题: [讨论]请教:如何作出好的细胞学的免疫组化...

分离红细胞可用淋巴细胞分离液（ficoll－hypaque），也可以用裂解的方法如Tris－NH4Cl，蒸馏水，草酸胺等。简单一点离心后，倾去上清液，用吸管取白膜，略带有红细胞，涂片后固定红细胞溶解。不能用醋酸裂解，抗原改变出假阴性结果。固定用多聚甲醛，丙酮，乙醇，甲醇皆可。

作者: 铁牛 时间: 2011-3-29 11:43

细胞蜡块做免疫组化不是蛮好的

作者: encounter 时间: 2011-5-9 23:35

学习了

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