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标题: 请教:核抗原 [打印本页]

作者: wsbsts-xy    时间: 2006-8-15 09:47     标题: 请教:核抗原

免组中SABC法热修复抗原法说适用于核抗原,易被固定破坏的抗原。
请教各位前辈MCP-1是核抗原吗?
自己的免组即将开始但这个问题还没解决,急啊
在此小生先谢过了
作者: shanghainese    时间: 2006-8-16 11:20

MCP-1, 可以用ELISA, Western, CBA, 原位杂交来测.
免组测不出来.
作者: wsbsts-xy    时间: 2006-8-16 14:18

!!!???
可我看到过文献有用免组测的
天哪,急
在线等着版主赐教
作者: wsbsts-xy    时间: 2006-8-16 14:30

有篇文章的摘要是这样的
剪切力对单核细胞趋化蛋白-1合成和分泌的影响  【论文题名】 剪切力对单核细胞趋化蛋白-1合成和分泌的影响  【论文作者】 于红梅  【作者专业】 生物医学工程   【导师姓名】 曾衍钧 胡金麟   【授予学位】 硕士  【授予单位】 北京工业大学   【授予时间】 20010501  【 分类号 】 Q66 R318.01   【 关键词 】 血流剪切力 脐静脉内皮细胞 HUVEC 动脉粥样硬化 单核细胞趋化蛋白-1 MCP-1   【 摘 要 】 该实验主要以体外培养的人脐静脉血管内皮细胞为实验对象,通过特殊的流动装置,施加不同水平的流体剪切力,运用免疫学方法观察和分析血管内皮细胞合成与分泌MCP-1的规律.首先,采用免疫组化方法,观测不同时间和大小的剪切力作用下细胞胞浆中合成的MCP-1,图象分析结果表明,MCP-1的合成是随剪切力大小和作用时间的变化而变化的.其次,采用酶联免疫吸附法,检测不同时间内皮细胞分泌出的MCP-1量.以上的研究证明剪切力可以在多个水平影响内皮细胞的结构和功能,在对细胞因子如MCP-1的调控中,可以从转录水平,翻译水平,蛋白质的加工与最后分泌出细胞的环节上影响MCP-1的产生,从而引发动脉粥样硬化的形成.
作者: wsbsts-xy    时间: 2006-8-16 14:32

如果免组侧不出来,那怎么会有MCP-1的抗体呢
作者: shanghainese    时间: 2006-8-16 22:41

引用:
原帖由 wsbsts-xy 于 2006-8-16 06:32 发表
如果免组侧不出来,那怎么会有MCP-1的抗体呢
MCP-1的抗体可以用在许多免疫检测上,不一定只在免疫组化上。
作者: shanghainese    时间: 2006-8-16 22:56

MCP-1,是水溶性的蛋白。 它合成后在细胞内的时间很短,量不多。所以在组织里很容易丢失或找不到。
检测细胞内的MCP-1,要把细胞收集,刺激再加上 intracellular protein transport inhibitor, 不让MCP-1从细胞里跑掉才能将MCP-1检出来。
所以细胞里的MCP-1,可以用流式细胞仪或做免疫细胞化学(Immunocytochemistry, ICC). 而不是免疫组织化学(Immunohistochemistry, IHC).

对於您所列举的参考文献,本人不想作任何评论。
不过您可以多看点文献,特别是国外的文献。
作者: wsbsts-xy    时间: 2006-8-17 22:16

多谢版主赐教




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