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标题: 【求助】关于免疫组化阳性、阴性对照，以及图像分析问题 [打印本页]

作者: taofseu 时间: 2006-11-16 13:18 标题: 【求助】关于免疫组化阳性、阴性对照，以及图像分析问题

各位老师好，我现在做大鼠变应性鼻炎模型鼻粘膜中蛋白A的免疫组化，想看看正常组和患病组有无差别。现在国内外没有找到别人报道过，由于经费不够，所以没有没有用ELISA，预实验发现正常组和患病组都有着色（EnVision二步法），问题是：
1、阳性对照和阴性对照都需要做吗？（阳性对照是鉴别假阴性的是吧？既然两组全有表达，是不是阳性对照就不要了？）如果需要，该怎么设计对照？
2、结果我需要取五个视野，数阳性细胞个数进行统计分析，由于蛋白A可能在多种细胞中表达，那到时候我是不是要分类计数阳性细胞？听说图像分析系统可以进行免疫组化结果统计分析（好像是什么灰度值），不知道南京地区有没有
学生初次做免疫组化，很多不是很懂，恳请各位老师的指点，学生先谢了

作者: shanghainese 时间: 2006-11-17 12:18

1、阳性对照和阴性对照都需要做.不然怎样鉴别真阳性,假阳性, 和真阴性,假阴性?
2、白A可能在多种细胞中表达, 但是您需要找的是什么细胞? 各个细胞之间的关系? 蛋白A的生物功能等等都是您可以研究的对象.图像分析系统可以进行免疫组化结果统计分析（好像是什么灰度值），但这只是一组参数.南京地区有没有我就不知道了. 因为我不在南京工作.

作者: taofseu 时间: 2007-10-22 23:01 标题: 回复 #2 shanghainese 的帖子

感谢您的回复，快一年过去了，再次回来甚是亲切，实验已经差不多搞定，正处结果统计时，免疫组化结果可以用IPP分析，详细情况可以见丁香园中相关帖，内容比较多，需耐心学习，祝大家实验顺利

作者: alamisi 时间: 2007-12-18 12:24

hehe 和我现在遇到的问题好像啊不知楼主怎么解决的啊我也是做的分子没有人做过的而且也是在我认为的阴性组中也有表达强度还差不多求教啊谢啦

作者: 鱼越龙门 时间: 2007-12-27 17:13 标题: 回复 3# 的帖子

taofseu你好:能说的具体些么?我也遇见同样问题,不知能否提供,可用于细胞计数及灰度分析软件下载网址,

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