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标题: 请教关于冰冻切片的固定问题 [打印本页]

作者: fayfay2005 时间: 2005-1-27 21:38 标题: 请教关于冰冻切片的固定问题

我目前在做老鼠视网膜的矢状面冰冻切片，由于所需量较大，我们事先将新鲜取出的老鼠眼球用甲醛固定PBS缓冲，然后再根据需要取出做冰冻切片，现在有几个问题
1.今天分别做了几张10个UM 8UM 5UM的冰冻切片，发现片子相当容易脱片，是否是我没有固定的缘故，请问切好的冰冻片是否需要固定液固定，哪种比较好？

2.我发现镜下的细胞结构有些固缩，是否是事先用固定液固定的结果，如果采用新鲜组织的话做冰冻切片的话，又担心视网膜的脱离以及矢状面的位置不正，请问有什么好的方法么？？
谢谢！

作者: dingwei 时间: 2005-1-27 23:09 标题: 请教关于冰冻切片的固定问题

新鲜取出后,先做冰冻切片,再放入甲醇里固定,就不会脱片了.

作者: fayfay2005 时间: 2005-1-28 13:16 标题: 请教关于冰冻切片的固定问题

丁老师是甲醇还是甲醛??

作者: hunter3035 时间: 2005-1-28 22:32 标题: 请教关于冰冻切片的固定问题

我们用酒精

作者: fayfay2005 时间: 2005-1-29 11:18 标题: 请教关于冰冻切片的固定问题

我查了一些资料有用甲醇固定的也有用多聚甲醛固定的也有用纯二甲苯或者酒精固定的
我想问下如果是想防止脱片的话应该在甲醇里固定多少时间为宜?
谢谢

作者: dingwei 时间: 2005-1-29 21:10 标题: 请教关于冰冻切片的固定问题

5分钟就行了.

作者: fayfay2005 时间: 2005-1-29 21:17 标题: 请教关于冰冻切片的固定问题

好,我去试试看!
谢谢丁老师

作者: liuhuaqin 时间: 2005-1-30 12:54 标题: 请教关于冰冻切片的固定问题

也可用冷丙酮（4度）固定10至15分钟。

作者: hhhuuuaaa 时间: 2005-2-26 12:07 标题: 请教关于冰冻切片的固定问题

我们是用酒精固定的:em02: 时间是5分钟内!!! :em14:

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