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标题: 请教为何我的染色很浅 [打印本页]

作者: a0038161 时间: 2007-1-11 11:25 标题: 请教为何我的染色很浅

各位老师请教一个问题：
我在作免疫组化，标本是hela细胞。用的是ABC法，抗体浓度到了1：50，染色还是淡----公司的人说的。
可能哪里出了问题呢？

作者: shanghainese 时间: 2007-1-11 11:52

有很多原因，如固定，洗涤，抗体浓度，孵育时间和温度，显色时间，试剂质量等等。
所以很难判断您的问题所在。

作者: folksmile 时间: 2007-1-11 11:53 标题: 抢个沙发，呵呵

看了阳性和阴性对照没？

作者: folksmile 时间: 2007-1-11 11:54 标题: 啊？！，二楼也不错的了

写的时候还是沙发，传上去就是二楼啦；呵呵，下次吧

[ 本帖最后由 folksmile 于 2007-1-11 11:57 编辑 ]

作者: a0038161 时间: 2007-1-11 12:42

hela就是阳性对照，biolegend公司把它当作质控。本来想染石蜡切片的，结果石蜡切片染不出，hela又很浅。
我使用-20度甲醇固定，所有孵育步骤均是37度孵箱，采用PBST洗涤，均是3次，每次5分钟。
对照用血清30分，一抗60分，二抗30分，ABC30分，DAB2--6分，对比染色5--10秒
请问，其中有哪些条件可以在改一下？
谢谢诸位老师！

作者: shanghainese 时间: 2007-1-11 12:50

引用:

原帖由 a0038161 于 2007-1-11 12:42 发表
hela就是阳性对照，biolegend公司把它当作质控。本来想染石蜡切片的，结果石蜡切片染不出，hela又很浅。
我使用-20度甲醇固定，所有孵育步骤均是37度孵箱，采用PBST洗涤，均是3次，每次5分钟。
对照用血清30分， ...

什么抗体？哪个克隆？

作者: a0038161 时间: 2007-1-11 13:34

MICA/B 6D4 单克隆抗体公司说可以做ihc

作者: folksmile 时间: 2007-1-11 18:44

引用:

原帖由 a0038161 于 2007-1-11 13:34 发表
MICA/B 6D4 单克隆抗体公司说可以做ihc

公司说可以吗？

[ 本帖最后由 folksmile 于 2007-1-11 18:53 编辑 ]

作者: shanghainese 时间: 2007-1-12 10:09

只有找biolegend公司帮忙了。

作者: a0038161 时间: 2007-1-12 11:22

多谢帮忙了。

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