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标题: 求助:关于胶质细胞的免疫荧光染色 [打印本页]

作者: spingmao2005    时间: 2007-5-11 19:18     标题: 求助:关于胶质细胞的免疫荧光染色

我最近要做脊髓背根神经节(DRG)星形胶质细胞(和小胶质细胞)的GFAP(小胶质细胞ox-42)和TNF荧光双标。因为抗体比较少,所以很宝贵,如果做几次不出结果就要重新买抗体了。不知道大家能否给一些建议呢?谢谢哦
1.能否说说您觉得我做冰冻切片的详细步骤应该怎么做?
2.检索本论坛时,有的老师说:由于小胶质细胞ox-42是表面抗体,所以不要用多聚甲醛灌流和固定。这是否合适? 如果可以固定,最好固定多长时间?
3.一抗、二抗孵育多长时间合适?
4.脊髓和背根神经节(DRG)冰冻切片的厚度是多少合适?是贴片好还是漂片好呢?

如果能够得到老师您的指导,是我无上的荣幸~再次感谢·@.@
作者: shanghainese    时间: 2007-5-12 11:16

本论坛里后果这些讨论,请您自己费些时间查找一下。
您说得的OX-42是抗大鼠CD11b/c(表面分子) 抗体,克隆名OX-42。 这个抗体不能用于甲醛固定的组织切片上。




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