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标题: 丁老师请进，请教您一个问题，谢谢！！！ [打印本页]

作者: Micheal 时间: 2007-11-15 21:39 标题: 丁老师请进，请教您一个问题，谢谢！！！

丁老师您好！！
   首先谢谢您给我们做病理的科研人员提供一个很好的交流平台，谢谢您！
   我现在有个最基本的问题，好像是没有搞清楚，请您解答。
问题是：取材后的固定，通常采用的是甲醛溶液，甲醛固定的目的是使组织中的蛋白质变性，甲醛不是沉淀性固定剂，是化合性的，那它使组织中蛋白质变性后，甲醛是以什么样的状态存在于组织内？甲醛与蛋白质化合，从而使蛋白质变性固定，但固定后的下一步就是洗涤，用流水冲洗，目的是将组织中残留的甲醛冲洗干净，以免影响染色，这里的问题就是，流水冲洗使甲醛流走，那它是如何又与蛋白质分离开的？甲醛与蛋白质分离开后，那蛋白质这时候难道就不再发生分解之类的么？
   丁老师，这是一个非常基本的问题，但是我现在有些想不明白，还请您解惑！！！万分感激！！！祝您工作顺利，身体健康，事事顺心！！！

作者: Micheal 时间: 2007-11-17 18:49

丁老师，麻烦您在闲暇之余为晚辈解惑 ~

作者: dingwei 时间: 2007-11-17 20:37

流水冲洗，目的是将组织中多余的甲醛冲洗去，但不是你说的干净，洗去的也只是组织表面和细胞间隙中的一小部分。和蛋白质结合的甲醛，要分离出来很难，时间也需很长，但如果你流水冲洗一个月二个月的，那蛋白质肯定会发生分解、变质、组织也就腐烂了。

作者: Micheal 时间: 2007-11-19 21:39

谢谢丁老师，麻烦您了，我知道在这个问题上我有点钻牛角尖了
谢谢您解惑

作者: shanghainese 时间: 2007-11-20 10:23

引用:

原帖由 Micheal 于 2007-11-15 21:39 发表
丁老师您好！！
首先谢谢您给我们做病理的科研人员提供一个很好的交流平台，谢谢您！
我现在有个最基本的问题，好像是没有搞清楚，请您解答。
问题是：取材后的固定，通常采用的是甲醛溶液，甲 ...

好问题。
我们在工作中就是要善于发现问题，想办法解决问题。
甲醛固定的问题是个基本的问题。在医科大学的有机化学教材里有其原理。在中学的有机化学教材里也可能有。

[ 本帖最后由 shanghainese 于 2007-11-21 11:27 编辑 ]

作者: folksmile 时间: 2007-11-20 18:29

http://en.wikipedia.org/wiki/Formaldehyde

刚看了一下wiki，甲醛在蛋白质间形成交联，DNA间也有类似结构生成；还有一个重要问题，就是丁老师说的：防腐。

作者: shanghainese 时间: 2007-11-21 11:15

甲醛具有较高的反应活性，可以和带有—OH（羟基）、—SH（巯基）、—NH2（氨基）基团的分子发生亲核加成反应，最终甲醛作为亚甲基（—CH2—）的提供者，与上述基团中的两个基团反应，使自由的分子链被甲醛交联起来，失去原有的生理功能。

甲醛与蛋白质结合比较牢固。不会被水一冲就冲掉了。正如丁老师说的那样，流水冲洗的目的是将多余的甲醛冲洗去。

[ 本帖最后由 shanghainese 于 2007-11-21 11:37 编辑 ]

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